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目的本研究在酒精联合脂多糖的基础上建立大鼠慢性胰腺炎的动物模型,并通过灌服姜黄素,观察姜黄素对实验性大鼠慢性胰腺炎的影响,并对其机制作初步研究。方法1.实验性慢性胰腺炎大鼠动物模型的建立。24只1月龄雄性SD大鼠随机分为对照组、酒精组、脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组和模型组,每组各6只。各组给予普通饲料,对照组和LPS组饲以饮用水,酒精组和模型组饲以25%酒精,模型组和LPS组大鼠饲养12周后给予反复腹腔注射脂多糖(2mg/Kg体重),每周1次,共4次。最后一次注射后1周处死大鼠。在光镜下观察胰腺组织结构变化,用Masson染色法观察胰腺组织胶原的改变,并测定血糖、胰腺组织匀浆中的淀粉酶和脂肪酶含量,观察实验大鼠胰腺内外分泌功能及其组织病理学的改变。2.为研究酒精联合脂多糖对胰腺星状细胞和胰腺纤维化的影响。通过免疫组化方法观察胰腺α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和I型胶原表达,RT-PCR法检测胰腺组织α-SMA mRNA、纤维连接蛋白(fibronectin,Fn) mRNA表达,以Western blot方法检测α-SMA蛋白质的表达。3.观察姜黄素对实验性大鼠胰腺纤维化的影响。将18只1月龄雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组各6只。给予普通饲料,模型组以25%乙醇代水饮,治疗组将姜黄素(300mg/Kg体重)溶入25%酒精配成混悬液代替饮水。饲养12周后,模型组和治疗组大鼠通过腹腔反复注射脂多糖(2mg/Kg体重),每周1次,共4次。17周后处死全部大鼠。在光镜下观察胰腺组织结构变化,进行病理评分。用Masson染色法观察胰腺组织胶原的改变,并测定胰腺组织匀浆中的淀粉酶和脂肪酶含量及血糖水平,通过RT-PCR检测胰腺组织转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA表达。结果1.通过观察发现模型组胰腺小叶内可见炎症细胞浸润,胶原纤维较对照组、酒精组和LPS组明显增多,胰腺组织匀浆淀粉酶和脂肪酶含量降低(P<0.05)。2.模型组中胰腺组织中I型胶原表达增加,α-SMA mRNA、Fn mRNA和α-SMA蛋白的表达均高于对照组和酒精组、脂多糖组(P<0.01)。3.治疗组胰腺组织病理评分、胶原含量、TGF-β1mRNA表达均低于模型组(P<0.05)。姜黄素治疗组胰腺组织匀浆淀粉酶和脂肪酶含量分别为7347.81±101.93U/g,14135.25±1272.10U/g,均高于模型组(P<0.05)。结论1.在长期摄入乙醇的基础上反复腹腔注射脂多糖可造成大鼠慢性胰腺炎的发生。2.乙醇联合脂多糖可促进α-SMA的表达,刺激PSCs激活,促进胰腺纤维化。3.姜黄素具有抗慢性胰腺炎胰腺纤维化的作用,其机制可能与抑制TGF-β1的产生有关。