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目的：本研究以肝癌细胞HepG2为研究对象,探讨内质网蛋白3(Reticulon3, RTN3)与自噬的关系,并对RTN3参与细胞脂质代谢与胆固醇流出及其可能的机制做初步的探讨。方法：(1)通过营养剥夺诱导细胞发生自噬,WB检测RTN3和自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3B (microtubule-associated protein1light chain3B, LC3B)的蛋白水平,并调节RTN3表达水平检测Beclinl与LC3B的含量,激光共聚焦检测RTN3是否参与自噬泡形成。(2)免疫共沉淀检测RTN3是否与Bcl-2和Beclinl有相互作用,激光共聚焦检测它们是否有共定位。(3)不同浓度HDL和他汀刺激取样WB检测RTN3与LC3B表达变化,探讨RTN3是否参与调控相关脂质的代谢过程。(4)调节RTN3表达用油红O染色检测胞内脂质变化,并用胆固醇流出检测RTN3对胆固醇流出的影响。(5)调节RTN3表达并用WB检测RTN3与ABCA1表达变化,在HDL和他汀刺激下检测RTN3与ABCA1是否有共定位,初步探讨RTN3参与胆固醇流出机制。结果：(1)营养剥夺诱导细胞自噬时,RTN3和LC3B均表达上调,上调RTN3表达则使LC3B明显增高;激光共聚焦实验发现LC3B和RTN3存在共定位。(2)免疫共沉淀和激光共聚焦结果表明RTN3与Beclinl存在相互作用。(3)随着HDL浓度增加,RTN3和LC3B均表达下调,他汀浓度增加时,RTN3和LC3B均表达上调。(4)油红O染色发现在RTN3高表达的细胞中脂滴数量下降,而RTN3低表达时脂滴在细胞内出现累积。当无HDL处理且RTN3高表达时胆固醇流出率高于RTN3低表达和正常组,在高浓度HDL诱导胆固醇流出时,RTN3高表达和低表达均抑制胆固醇流出。(5)在RTN3高表达和低表达时,ABCA1蛋白表达下降,并检测到ABCA1与RTN3共定位于胞内囊泡中。结论：(1)RTN3与Beclinl相互作用影响HepG2细胞的自噬水平；(2)RTN3可通过调节自噬参与的脂质代谢；(3)RNT3影响细胞内脂滴数量和胆固醇流出。