松果菊是一种具有很高药用价值的草本植物，能显著提高机体的抗菌和抗病毒感染能力，具有重要的开发潜力和广阔的应用前景，在国际上受到普遍重视。松果菊常规繁殖方法是种子繁殖和分株繁殖。松果菊单花结籽量少，种子具有不确定的休眠期，发芽率低；分株繁殖方法则繁殖系数很低，难以进行大规模的生产。由于松果菊异花授粉的生物学特点，栽培群体中存在多种植株类型，对田间管理和产品品质造成不利影响。但同时，松果菊群体中丰富的基因资源也使杂种优势的开发利用具备了很大的发展潜力。利用松果菊的离体培养调控技术可以快速生产基因型一致的苗，有利于松果菊的产业化发展。研究花药和花粉的离体培养，建立和优化诱导单倍体植株再生的培养技术体系，为下一步对再生的单倍体植株进行染色体加倍，从中选择自交不亲和或雄性不育材料，进而为利用自交不亲和或雄性不育材料作亲本进行杂交制种打下基础，而杂交亲本可以通过组织培养快速繁殖。 本研究首先以种子萌发取得无菌实生苗，无菌实生苗经过不定芽再生后得到各株系的克隆苗，采用9个不同株系克隆苗的叶片、叶柄和根作为外植体诱导不定芽的形成，观察到某些株系间不定芽的再生能力存在显著的差别；从总体上看，根的不定芽再生能力最强，叶柄外植体的再生能力也明显高于叶片。选用编号为7不定芽再生能力较强的株系为材料，比较了培养基中的激素种类和浓度以及琼脂、蔗糖、洲值对不定芽再生的影响，最终确定诱导不定芽再生的最佳培养基为MS+队0．5mg／L+NAA0．01mg／L，琼脂浓度为0．7％，蔗糖浓度为3％，pH为5．8。在不定芽再生过程中，发现松果菊玻璃化现象十分严重，以前没有人报道过松果菊离体培养过程中出现玻璃化现象。在不定芽再生最佳培养基的基础上添加了山梨醇、铜离子、水解乳蛋白、硝酸银、ABA，其中仅有铜离子、ABA对不定芽再生有促进作用。在培养过程中采用带有透气性盖子的塑料瓶，不定芽玻璃化程度比采用不透气的玻璃瓶的轻，再生的有效不定芽也比玻璃瓶中多。较低浓度的TDZ就可以诱导出愈伤组织，愈伤组织转接到分化培养基上很难分化出不定芽，TDZ在松果菊离体培养中培养效果较差。有关松果菊通过愈伤组织分化不定芽的培养方法有待进一步研究。 松果菊的快速繁殖可以采用两种方法，其一为萌发侧芽的繁殖方法，其二为直接不定芽再生的方法，直接不定芽再生方法的快繁效率要比侧芽增殖方法的高很多，用这两种方法得到的芽经过生根培养后都很容易移栽成活。不定芽生根的最佳培养基为MS+0．01mg／LNAA。 以花粉母细胞处于单核中晚期的花蕾为外植体，在诱导愈伤组织中，N6为基本培养基比MS为基本培养基更有效，N6培养基中添加BA0．5mg／L+NAA0．1mg／L花药愈伤组织的诱导率高达85．8％，比添加浓度为l、2、3mg／L的2，4一D诱导率都高。每瓶40ml培养基接种20、40、60、80、l∞枚花药，愈伤组织诱导率没有显著差别，愈伤组织转接入含不同NAA浓度的分化培养基上，在NAA为0．05mg／L时分化率最高，为95．24％。愈伤组织再生出的不定芽大部分都出现了玻璃化现象，没有玻璃化的不定芽很容易在MS-t-NAA0．01mg／L培养基上生根。在30株再生植株中，经过根尖染色体鉴定有19株为单倍体，其余为二倍体，没有发现混倍体。