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脊椎动物常受到外界微生物的入侵,因此物种自身形成了一套清除感染病原体的机制——免疫系统。免疫系统主要由两部分构成：天然免疫和获得性免疫。天然免疫是机体防御外来病原体入侵的第一道防线,它包含了巨噬细胞和树突状细胞。获得性免疫主要在免疫后期阶段参与清除病原体的活动并产生免疫记忆。免疫系统主要依赖抗原识别受体(pattern recognition receptor,简称PRR)识别病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,简称PAMP)。这些识别受体主要被分为TLR、 RLR、 NLR以及一些DNA受体等。机体的受体在识别了病原体后,能够通过招募下游的接头蛋白进行免疫信号转导,从而激活免疫信号通路。在免疫信号通路中能够激活一些转录因子,包括IRF3, IRF7, AP-1, NF-κB等,这些转录因子能够促进其下游的I型干扰素或者炎症因子的转录与表达,从而激活免疫反应。转录因子NF-κB在包括免疫反应在内的众多生命活动中发挥了重要的功能。因此,激活NF-κB的信号反应途径受到严格的调控,以免产生对机体有害的后果。在我们的研究中发现,一个名叫USP2a (ubiquitin-specific protease2isoform a)的蛋白能够抑制TLR/IL-1β和仙台病毒诱导激活的NF-κB。过量表达USP2a能够抑制IL-1β和仙台病毒诱导的NF-κB的激活以及下游炎症因子的产生。我们也构建了敲除USP2基因的HCT116细胞,并用这些细胞进行了实验。结果表明敲除了USP2a能够增强TAK1和IKK复合物的磷酸化和降解,IKBα的磷酸化及降解,NF-κB的激活以及下游炎症因子的转录。由此我们判断USP2a是一个抑制NF-κB激活的蛋白。我们也寻找了USP2a作用的分子,并发现USP2a能够持续性的和TRAF6(tumor necrosis factor receptor-associated factor6)发生相互作用,并且这种作用是不受刺激例如IL-1β的影响。由于USP2a是一个去泛素化酶家族蛋白,我们也验证了其去泛素化活性。我们发现USP2a能够去除TRAF6上被IL-1p和仙台病毒诱导产生的K63位连接的泛素化链。而且缺失了USP2a能够促进TRAF6上这种泛素化链的生成。我们也发现了对USP2a去泛素化功能而言至关重要的氨基酸残基。我们的实验结果提供了一个相对广谱的负调控NF-κB激活的机制。泛素化是免疫信号转导中一个重要的信号传导机制,同时去泛素化对信号转导的调控也至关重要。目前人们了解到的去泛素化酶还不多,还有近百种去泛素化酶其功能还不被人们知晓,因此对去泛素化的研究还有待进一步深入。而对于USP2a这个蛋白来说,其功能的了解我们做得也不够完整。从它同家族的蛋白中我们可以了解去泛素化酶的作用位点很多,USP2a可能不只作用于TRAF6一个位点,而这个蛋白还有一些其他的间接形式,对于这些间接形式的研究进行的也不是很充分。而USP2a是通过怎样的机制去除TRAF6上的泛素化,我们目前也不是很清楚,这都有待于下一步的研究。