黄荆子乙酸乙酯提取物诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及分子机制

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目的研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用,并探讨其作用分子机制。方法体外培养MCF-7细胞,AO/EB双染色荧光显微镜观察凋亡细胞形态;FITC标记annexin V/PI流式细胞术分析凋亡细胞百分率;DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA核小体间断裂的梯形条带;比色法测定细胞caspase-3活性;Western Blotting检测细胞Mcl-1、Bax和Bcl-2蛋白表达。结果AO/EB双染色荧光显微镜观察结果表明:Evn-50在3.0μg/ml、72h诱导典型凋亡形态MCF-7细胞数目增加(P<0.05)。FITC标记Annexin-V/PI双染流式细胞术结果表明:Evn-50诱导MCF-7细胞凋亡百分率增高(P<0.05),在3.0μg/ml、48h作用最明显。DNA琼脂糖凝胶电泳发现:Evn-50可以诱导MCF-7细胞凋亡产生DNA核小体间断裂的梯形条带。Caspase-3活性测定结果表明,Evn-50在3.0μg/ml、48h激活caspase-3活性最强(P<0.05)。Western blotting分析结果显示,EVn-50有效下调Bcl-2、Mcl-1蛋白表达和上调Bax蛋白表达(P<0.05)。结论Evn-50有效诱导MCF-7细胞凋亡,其作用机制与其下调细胞Bcl-2、Mcl-1蛋白表达、上调Bax蛋白表达和活化caspase-3相关。
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