本研究选用水牛排卵前卵泡的颗粒细胞为研究对象，在体外培养体系中添加影响卵巢功能的促卵泡素(FSH)、雄激素、雌二醇和孕酮，探讨它们在不同浓度下对颗粒细胞凋亡、分裂和分泌的影响。采用流式细胞术研究了体外培养的颗粒细胞凋亡率和细胞分裂指数，并用放射免疫分析方法检测了培养液中孕酮和雌激素浓度的变化，Hochest33342荧光染色检测无血清培养的细胞中是否存在凋亡细胞。本研究结果表明，采用无血清培养液培养24小时后，Hochest33342荧光染色出现明亮的蓝色团块，证实为凋亡的颗粒细胞，荧光显微镜视野下计数凋亡率与流式细胞术检测无明显差异，可作为本实验对照。体外培养的水牛颗粒细胞经过不同单位浓度FSH、雄激素、雌激素和孕酮处理后，发现FSH能显著地抑制颗粒细胞凋亡，促进细胞分裂，并能显著地促进颗粒细胞分泌雌、孕激素，都具有剂量依赖性；雄激素显著地促进颗粒细胞凋亡，降低了细胞分裂及分泌雌、孕激素的浓度：雌二醇能显著地抑制颗粒细胞凋亡，促进颗粒细胞分泌孕激素，呈剂量依赖性，亦促进颗粒细胞分裂但无剂量差异性；孕酮在1ng／mL～1μg／mL范围内能抑制颗粒细胞凋亡，而在1pg／mL、1mg／mL浓度下却引起颗粒细胞凋亡，并且抑制颗粒细胞分泌雌激素，但不影响细胞分裂。当1mg／mL FSH分别与1mg／mL、1μg／mL的雄激素共同处理颗粒细胞时，凋亡率也明显低于对照组和1mg／mL、1μg／mL雄激素