论文部分内容阅读
Merlin由神经胶质瘤II型基因NF2编码,属于ERM蛋白家族成员。以前的研究表明Merlin蛋白主要定位于细胞皮质区，通过与其互作蛋白相互作用在细胞膜和细胞骨架水平抑制促生长信号的传递。然而近来的研究表明Merlin蛋白存在细胞周期依赖性的核质穿梭现象，这就暗示Merlin可能在细胞核中与某些蛋白相互作用以一种我们目前还未知的机制发挥其抑癌作用。我们通过酵母双杂交筛选到一个新的Merlin结合蛋白PICT-1。一些证据已经表明PICT-1是一个肿瘤抑制子，但目前对PICT-1的抑癌分子机制还没有完全了解，比较明确的是PICT-1能够结合和稳定重要抑癌蛋白PTEN，进而发挥PTEN依赖性的细胞生长抑制和促凋亡功能。在本研究中，我们通过激光共聚焦观察和免疫共沉淀实验表明PICT-1是一个核仁定位蛋白，随着PICT-1的过表达，Ser518去磷酸化的闭环形式的Merlin（生长抑制形式的Merlin）优先在细胞核中累积并与PICT-1互作。PICT-1在HeLa细胞以及PTEN功能缺失的U251神经胶质瘤细胞中过表达能够显著地抑制cyclinD1的表达，阻止细胞在G0/G1期，抑制细胞的生长和增殖，促进细胞的凋亡。失去Merlin结合能力的PICT-1（1-356）截短突变体对U251神经胶质瘤的cyclin D1表达、细胞周期进展以及细胞生长和增殖的抑制能力显著下降；Merlin的Knockdown也显著缓解了PICT-1过表达引起的细胞生长抑制作用，而PICT-1的Knockdown没有显著影响Merlin对细胞生长的抑制作用，因此PICT-1抑癌作用的发挥是Merlin依赖性的。综上所述，我们的结果表明除了在细胞膜和细胞骨架水平发挥抑癌作用外，Merlin还可以在细胞核仁中与PICT-1相互作用，介导PICT-1诱导的细胞生长抑制作用。