目的：研究咽舒喷雾剂的药效学作用。　　研究背景急慢性咽炎是临床常见病、多发病，目前还没有令人满意的治疗药物。咽舒喷雾剂是由11味中药组成的复方制剂，前期作为医院制剂治疗急慢性咽炎疗效显著。在国家十一五“重大新药创制”科技重大专项的资助下，对咽舒喷雾剂进行了产业化开发研究中，本课题主要为咽舒喷雾剂的临床前药效学研究。　　采用二甲苯致小鼠耳肿胀及角叉菜胶致大鼠足肿胀模型研究咽舒喷雾剂对急性炎症的作用，并通过检测炎症因子COX-2和PGE2确定其抗炎通路；运用慢性肉芽肿和家兔慢性咽炎实验研究咽舒喷雾剂对慢性咽炎的影响；采用体外牛津杯法研究咽舒喷雾剂的体外抗菌活性；通过观察免疫系统中免疫器官、免疫细胞及功能研究咽舒喷雾剂对免疫功能的影响。1.咽舒喷雾剂对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响：雄性昆明种小鼠，随机分为生理盐水对照组、扶他林乳胶剂组、咽舒喷雾剂低剂量（涂药1次）组和咽舒喷雾剂高剂量（涂药2次）组，每组小鼠左、右耳前、后两面分别用棉棒涂生理盐水及相应药物。末次给药30 min后，在各组小鼠右耳涂二甲苯10μl（前后各5μl），1 h后处死动物，用9 mm打孔器于每只小鼠的左右耳相同部位打下耳片，分别称重，计算肿胀值、肿胀率和肿胀抑制率。2.咽舒喷雾剂对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响：雄性SD大鼠随机分为模型组、扶他林乳胶剂组和咽舒喷雾剂组，各组大鼠左足分别用棉棒涂生理盐水及相应药物（分5次给药，间隔15 min）。末次给药30 min后于大鼠左踝部作环形标记，用足趾容积测量仪测量大鼠左踝部作环形标记以下正常体积，然后在各组大鼠左足趾皮下注射1％角叉菜胶0.1 ml致炎。于致炎后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、2.5 h、3 h、4 h、和5 h分别测量大鼠左踝部环形标记一下体积，计算肿胀率。同时，于致炎后3h麻醉处死大鼠，剥离致炎足趾部位的组织，制备成10%匀浆，检测COX-2和PGE2。3.咽舒喷雾剂对大鼠慢性肉芽肿形成的影响：雄性Wistar大鼠10%水合氯醛麻醉，于肩胛骨之间正中切开约1 cm小口，在两侧皮下各植入一个20 mg的灭菌棉球，缝合。术后第2 d将造模大鼠随机分为模型对照组、扶他林乳胶剂组、咽舒喷雾剂小、中、大剂量组，在植入棉球处皮肤分别喷涂生理盐水、扶他林乳胶剂（每次100 mg）以及不同浓度受试药物（每次400μl），4次/d，连续7 d。末次给药24 h打开原切口，将棉球连同周围结缔组织一起取出，称取干重，计算肉芽肿抑制率。4.咽舒喷雾剂对家兔慢性咽炎的影响：实验兔雌雄各半，随机分为正常组、模型组、西瓜霜喷剂组、咽舒喷雾剂低、中、高剂量组，除正常对照组外，其余家兔按照彭氏造模法造模。造模后，各组咽部喷雾给药，4次/d，3揿/次，连续给药2周，末次给药24 h，取咽部组织HE染色，光镜下观察。5.咽舒喷雾剂体外抗菌实验：在无菌操作条件下，分别取金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌菌悬液200μl（浓度：1×107/ml），均匀涂抹在培养基上。自然干燥15 min，用无菌镊将牛津杯轻放在培养基表面，轻压使其接触良好。吸取不同浓度的咽舒喷雾剂药液（原液及倍比稀释的药液共7个浓度）个0.2 ml于牛津杯中，另外设置阴性对照组（生理盐水）、阳性对照组（青霉素），各样品重复3次，4℃放置4-5 h，30℃培养24 h，测量供试液有效抑菌圈的直径。6.咽舒喷雾剂对正常小鼠免疫器官和血白细胞计数的影响：雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、醋酸地塞米松（5 mg/kg）组、咽舒喷雾剂小（10 g/kg）、中（20 g/kg）和大（40 g/kg）剂量组。每天灌胃给予相应药物1次，共7 d。末次给药24 h，检测血常规，计算胸腺指数和脾脏指数。7.咽舒喷雾剂对正常小鼠单核-巨噬细胞功能的影响：雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、醋酸地塞米松（5 mg/kg）组、咽舒喷雾剂小（10 g/kg）、中（20 g/kg）和大（40 g/kg）剂量组。每天灌胃给药1次，共7 d。末次给药2 h，尾静脉注射印度墨汁（0.1 ml/10 g），注射后3 min和13 min内眦取血20μl，加入含0.1%Na2CO31 ml的EP管中，摇匀比色，取肝脏和脾脏计算吞噬指数。　　1.咽舒喷雾剂对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响：与对照组比较，扶他林组小鼠耳肿胀值和肿胀率均显著降低（p<0.05），肿胀抑制率为37.3%；咽舒喷雾剂高剂量组小鼠耳肿胀值和肿胀率均显著降低（p<0.05），肿胀抑制率为34.7%，低剂量组小鼠耳肿胀值和肿胀率与对照组比较未见显著差异。2.咽舒喷雾剂对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响：模型组大鼠注射角叉菜胶后，足趾肿胀随着时间延长而增加，2.5-3 h达到高峰；扶他林组足趾肿胀较缓慢，给药后2 h、2.5 h肿胀率与模型组比较显著降低（p<0.05）；咽舒喷雾剂组在给药后2 h、2.5 h与模型组比较也显著降低（p<0.05或p<0.01）。与模型对照组比较，扶他林乳胶剂与咽舒喷雾剂均能显著降低大鼠肿胀组织COX-2（p<0.01；p<0.05）与PGE2（p<0.01；p<0.05）含量。3.咽舒喷雾剂对大鼠慢性肉芽肿形成的影响：扶他林乳胶剂组与咽舒喷雾剂大剂量组大鼠肉芽组织增生均显著低于模型对照组（p<0.01；p<0.05），小、中剂量组大鼠肉芽组织增生与对照组比较无显著差异。4.咽舒喷雾剂对家兔慢性咽炎的影响：病理检测，正常组细胞核正常，上皮未见增生，细胞核内染色质正常；模型组淋巴细胞浸润较明显，结缔组织增生，细胞间连接不紧密，血管扩张增生，胞浆内有黏液；西瓜霜喷剂组及咽舒喷雾剂大剂量组有轻微线粒体肿胀及少量炎性细胞浸润；咽舒喷雾剂小、中剂量组：炎性细胞浸润较明显，细胞核形态不规则，血管扩张增生明显。5.咽舒喷雾剂体外抗菌实验：与生理盐水比较，青霉素对金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌有明显的抑菌圈（44.3±1.6 mm；19.3±0.6 mm），咽舒喷雾剂原液及2、4、8、16倍稀释液对金黄色葡萄球菌有明显抑菌圈，咽舒喷雾剂原液和2、4倍稀释液对乙型溶血性链球菌有明显抑菌圈。6.咽舒喷雾剂对正常小鼠免疫器官和血白细胞计数的影响：与正常对照组比较，醋酸地塞米松能显著降低正常小鼠的胸腺与脾脏指数（p<0.01）和血淋巴细胞数（p<0.01），咽舒喷雾剂不同剂量对正常小鼠的胸腺与脾脏指数和血淋巴细胞计数无显著影响。7.咽舒喷雾剂对正常小鼠单核-巨噬细胞功能的影响：与正常对照组比较，醋酸地塞米松能显著降低正常小鼠的吞噬功能（p<0.01），咽舒喷雾剂不同剂量对正常小鼠吞噬功能无显著影响。　　咽舒喷雾剂对急性炎症有显著的抑制作用，对慢性炎症有明显的缓解作用，且其抗炎作用与抑制炎症因子COX-2和PGE2有关。在体外抗菌实验中，咽舒喷雾剂对革兰氏阴性菌和阳性菌均有明显的抑制作用。咽舒喷雾剂对免疫器官、免疫细胞及功能无抑制作用。