中药质量控制是中药发挥临床疗效的关键保障。中药具有“多成分、多靶点”的特点,以具有活性的特征成分作为质量控制指标进行中药材质量控制尤为重要。然而当前现存的以化学标志物为主的质控指标单一,与药效关联性不强,不能全面地反映药材质量与活性成分、活性成分与药效之间的关系。中药传统提取方法如超声法、加热回流法等存在提取时间长、试剂消耗大、步骤繁琐等局限性,需要更为绿色新颖的样品前处理方法。因此,筛选中药具有活性的特征成分,结合中药绿色提取方法,建立中药活性特征成分量化指标体系,对于合理地建立中药质量评价方法具有十分重要的意义。本论文利用体外分子对接虚拟筛选技术结合体外抗凝血酶活性测定方法,探索了中药中天然黄酮类成分抗凝血酶构效关系,为活血化瘀及凝血中药作用机制提供科学依据;利用液相-质谱联用结合代谢物组学技术与体外抗凝血酶活性测定方法,筛选了蒲黄抗凝血酶活性特征成分;建立了基于分子筛-基质固相微萃取的蒲黄多活性黄酮类成分提取与定量研究技术,减少样品前处理过程的有机试剂的消耗,建立中药蒲黄绿色质量评价方法;利用液相-质谱联用技术建立体内定量分析方法,对大鼠口服蔓荆子水提物与醇提物后入血成分进行了比较药代动力学研究。具体研究结果如下:1.利用分子对接技术对103个天然黄酮类成分与凝血酶结合能力进行虚拟筛选,采用体外抗凝血酶显色底物法对筛选出42个黄酮化合物进行活性测定。研究结果表明有22个黄酮类成分对凝血酶具有直接抑制作用。通过对不同成分之间结构和活性的比较分析发现,C环C2、C3、C4位,A环C5、7位,B环C3’、C4?、C5?位为黄酮化合物抑制凝血酶的关键活性位点,而C=C、C=O键和OH基团是黄酮抑制凝血酶不可或缺的取代基团。本研究探讨了黄酮类化合物抗凝血酶的重要活性位点和关键基团,为促进黄酮活性机制研究、设计开发有效的黄酮类凝血酶抑制剂提供研究思路。2.本研究提出了基于代谢物组学结合化学计量学和体外抗凝血酶活性测定方法,筛选活性-化学组合质量标志物用于中药蒲黄质量评价研究。利用UHPLC-Q-TOF/MS技术获取23批样品的代谢特征及组分特征,采用显色底物法结合高效液相色谱法评价蒲黄对凝血酶的直接抑制作用,利用监督分类器筛选与抗凝血酶活性相关的生物活性-化学组合质量标志物并建立了预测模型。结果表明,19个批次样品对凝血酶有抑制作用,在蒲黄样品中共鉴定出22个化合物。其中柠檬酸和亚麻酸的IC₅₀值分别为0.52±0.02和0.51±0.02 mg/m L。最后筛选出柠檬酸、亚麻酸、新蒲香苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷作为蒲黄抗凝血酶活性-化学质量组合标志物。3.选择蒲黄中六个黄酮类活性成分（表儿茶素、新蒲香苷、异鼠李素-3-O-新橙皮苷、柚皮素、异鼠李素、山奈酚）为指标,同时通过考察蒲黄粒度、吸附剂的种类,样品与吸附剂的比例,研磨时间、洗脱剂浓度与体积等因素对提取效率的影响,结合响应曲面中心设计优化六个总黄酮的提取条件,建立了工业级分子筛MCM-41辅助基质固相分散微萃取技术结合超高效液相色谱的蒲黄质量评价分析方法。研究结果表明最佳提取条件为:25 mg过200目筛的蒲黄细粉和35 mg工业级MCM-41在研钵中混合研磨2min,用1.25 m L 70%甲醇洗脱。与中国药典使用的传统加热回流法相比,该方法所需样品量少,有机溶剂消耗少,提取时间短,符合“绿色化学”的理念,为中药质量控制提供了新技术。4.建立了UHPLC-MS/MS体内分析方法,测定大鼠口服给药蔓荆子水提物与醇提物后穗花牡荆苷、10-O-香草酰杜仲苷、木犀草素、紫花牡荆素的血药浓度,阐明了大鼠口服中药蔓荆子水提物与醇提物4个主要化合物的药代动力学差异。采用乙酸乙酯液液萃取法对血浆样品进行净化处理,选择芒柄花黄素和栀子苷为内标溶液。绘制药时曲线,计算分析大鼠口服两种提取物后4个活性成分的主要药代动力学参数。结果显示4个分析物的相关系数r²均大于0.990,表明线性关系良好。除了醇提物中10-O-香草酰杜仲苷在血浆中未检测到,其余化合物均在血浆中检测到。药代动力学结果表明,两种提取物体内吸收情况差异较大,表明不同提取方法对药物活性成分体内的吸收代谢具有不同的影响。本研究建立的液质联用分析方法高效、快速、灵敏,可成功地应用于大鼠口服中药蔓荆子水提物与醇提物的血浆药代动力学检测。