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由香蕉枯萎镰刀菌1、4号小种（Fusarium oxysporum f.sp. cubense race1/race4, Focr1/Focr4）引起的香蕉枯萎病是香蕉的毁灭性病害,其中Focr4的危害性最大,能侵染几乎所有的香蕉品种,由于Focr4的传入,给我国的香蕉生产带来了严重威胁。目前国内外均尚无十分有效的化学防治方法,也未培育出高抗的品种,其原因是香蕉枯萎病是维管束侵染的系统性病害,一般化学药剂不能凑效,长期不清楚香蕉枯萎镰刀菌的致病机理造成抗病育种靶标不明确。本研究通过研究来自海南不同市县及广东的Focr1和Focr4菌株的rDNA-ITS序列差异,找出1号小种与4号小种的单核苷酸共性差异,为快速检测香蕉枯萎镰刀菌1、4号小种提供理论依据;并通过研究建立Focr4的根癌农杆菌介导的T-DNA插入遗传转化（Agrobacterium tumefaciens- mediated transformation, ATMT）体系,构建Focr4的T-DNA插入突变体库,研究建立突变体致病力离体快速测定方法,筛选致病力丧失突变体,旨在为克隆Focr4的致病相关基因,为阐明其致病的分子机理奠定基础。取得的主要研究结果如下:1.通过接种巴西香蕉和粉蕉进行致病性测定以及通过特异引物PBL/PBR、PCL/PDR进行PCR扩增,明确鉴定出供试的香蕉分离菌株Foc37为Focr4,粉蕉分离菌株Foc2为Focr1。2.通过对所供试的3个Focr1和5个Focr4菌株进行rDNA-ITS测序分析,明确了香蕉枯萎镰刀菌4号生理小种和1号小种在rDNA-ITS序列的367bp与386bp位点存在两处共性差异,即4号生理小种在367bp与386bp位点的碱基均为T,而1号生理小种的碱基均为C。3.通过对Focr4和Focr1进行离体接种巴西香蕉和粉蕉的致病性测定试验,建立了一套Foc小种致病性大规模快速测定方法。4.筛选出了潮霉素在PDA培养基平板上对Focr4生长的最佳抑制浓度为150μg/ml。5.对根癌农杆菌介导的T-DNA插入Focr4的遗传转化体系的影响因子进行了优化,明确了共培养前用IM液体培养基（150μmol/L AS）诱导的最佳时间为6小时及以农杆菌OD600为0.15和Focr4孢子浓度为1×106个/ml等体积混合共培养48小时为最佳条件。6.建立了Focr4的T-DNA插入遗传转化体系,并利用该体系对Focr4进行遗传转化操作和转化质量检验,结果表明:平均每1×106个Focr4孢子可得到150～200个抗潮霉素的阳性克隆;从获得的突变菌株中随机抽样,以质粒pBHt2中潮霉素磷酸转移酶基因编码区设计了一对引物及Hf/Hr进行PCR检测,参试菌株均能扩增到819bp的片段,表明转化子的假阳性率低。在无潮霉素选择压力条件下连续转接培养6代后,转化子的抗潮霉素表型仍然保持稳定,表明获得的突变菌株的插入标记能稳定遗传。7.通过对获得的Focr4 T-DNA插入突变体进行致病性测定筛选,获得了1个致病性完全丧失的突变体Focr40321和2个致病力严重减弱的突变体Focr40088和Focr40003,以及14个菌落形态或颜色变异的突变体。