沙利度胺对人乳腺癌细胞血管内皮生长因子-C及其受体表达的影响

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目的:通过体外实验观察沙利度胺对人乳腺癌细胞血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)及其受体(vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2)的表达影响,进一步阐明沙利度胺抗血管生成作用的可能机制,探讨其用于治疗乳腺癌的可行性。 方法:选取两株经典的人乳腺癌细胞系MCF-7及MDA-MB-231,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测沙利度胺不同浓度组(6、30、60、120μg/ml)、不同时间组(24、48、72h)对细胞存活和生长的影响情况,从而选择适当的药物浓度及作用时间。根据MTT的结果,设置对照及实验组。分别提取各组细胞总RNA,鉴定其完整性及含量,通过逆转录—聚合酶链反应(revers transcription PCR,RT-PCR)半定量检测沙利度胺处理前后两株细胞中VEGF-C、KDR mRNA的表达水平。应用免疫细胞化学(immunocytochemistry,IC)方法定性观察沙利度胺处理前后MCF-7、MDA-MB-231细胞中VEGF-C、KDR蛋白的表达情况。采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)半定量检测沙利度胺处理前后两株细胞中VEGF-C及KDR蛋白的表达水平。 结果:1 MTT结果显示:沙利度胺在(6~120)μg/ml浓度范围内能明显抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞体外增
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