麦冬皂苷D对MCF-7乳腺癌细胞抗肿瘤作用与机制研究

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目的:本课题主要研究麦冬皂苷D对人乳腺癌细胞株MCF-7的增殖、周期和凋亡情况的影响,探讨麦冬皂苷D诱导MCF-7细胞凋亡的机制,从而为麦冬皂苷D的进一步临床研究提供理论依据。  方法:  1.MTT及细胞克隆形成实验。采用MTT法和细胞克隆实验研究麦冬皂苷D对体外培养的MCF-7乳腺癌细胞增殖活性及克隆能力的影响。  2.细胞周期实验和活细胞实验。通过细胞流式周期实验,探究麦冬皂苷D对MCF-7细胞周期的影响;通过观察活细胞分裂过程,分析麦冬皂苷D对细胞分裂情况的影响。  3.细胞凋亡、TUNEL实验。采用细胞凋亡实验和TUNEL实验,来研究麦冬皂苷D对MCF-7乳腺癌细胞凋亡情况的影响。  4.通过Western-blot,免疫荧光,Tubulin聚合实验,分子对接等实验探究麦冬皂苷D促进MCF-7乳腺癌细胞凋亡的机制。  结果:  1.麦冬皂苷D能抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖活性,使细胞克隆形成率明显降低,且具有时间、浓度依赖性。  2.麦冬皂苷D能将MCF-7乳腺癌细胞周期阻滞在G2/M分裂时期,并使细胞分裂时间延长。随着药物浓度和作用时间的增加,阻滞效果更加明显。  3.麦冬皂苷D可以诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡,促凋亡作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强。  4.机制研究表明,麦冬皂苷D促进MCF-7乳腺癌细胞G2/M期阻滞并诱导细胞凋亡与细胞周期相关蛋白CyclinB1,Caspase家族蛋白,及tubulin的活性紧密相关。  结论:实验结果表明,麦冬皂苷D可以抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖,将细胞周期阻滞在G2/M期并诱导其凋亡。相关机制研究发现麦冬皂苷D诱导MCF-7细胞凋亡与下调细胞周期相关蛋白CyclinB1的含量表达,激活Caspase家族蛋白活性密切相关。关于其更深层次的机制仍需要进一步的探究。
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