论文部分内容阅读
异体肌腱是ACL重建移植物选项之一。本实验通过对比自体肌腱、深低温冷冻异体肌腱、冻干异体肌腱重建ACL术后移植物生物学转化和腱骨愈合进程的动物实验研究,为同种异体移植物选择及术后康复提供组织学依据。新西兰兔共80只,随机选取20只获取双侧后腿趾长屈肌腱(FDL)共40根,经深低温冷冻及冻干后制备成深冻肌腱和冻干肌腱各20根。剩余60只兔随机平均分为自体组、深冻组、冻干组,每组20只,分别用相应移植物进行ACL重建术。于术后3周、8周、12周、24周,分别从三组中各选取5只术兔进行取材,用HE和番红固绿染色后行组织学观察。分别对关节内段(骨隧道外)、骨隧道内移植物成纤维细胞和腱骨界面软骨细胞进行计数,采用单因素方差分析、LSD-t检验对各组、各时间点数据进行统计学分析,骨隧道内外各组移植物成纤维细胞计数采用配对t检验进行统计学分析。组织学结果:移植物关节内段(骨隧道外),术后3周各组移植物表面滑膜覆盖,移植物内细胞结构消失,术后8周移植物浅层有成纤维细胞增殖,但深层为无细胞纤维,术后12周各组移植物浅层细胞数增多,由浅入深逐渐长入移植物,术后24周各组移植物浅层与深层细胞密度均匀一致,深层无细胞区域消失。移植物骨隧道内段,术后3周各组移植物表面肉芽组织覆盖,移植物内细胞结构消失,术后8周、12周、24周组织学结果同关节内段基本一致。移植物腱骨界面,术后3周各组腱骨界面肉芽组织增生、无软骨细胞,术后8周各组腱骨界面出现软骨细胞,并见斜形sharpey纤维,冻干组sharpey纤维密度和范围低于深冻组和自体组,术后12周各组软骨细胞增多,各组斜形sharpey纤维数量增多,自体组出现垂直形sharpey纤维,有连续性“潮线”结构;术后24周各组软骨细胞数量进一步升高,垂直形sharpey纤维比例增多,连续性“潮线”结构范围扩大。移植物血管化,血管化集中在移植物表层或浅层疏松组织内,术后8周、12周、24周可见血管数量逐渐增多、管径逐渐增粗,骨隧道外血管化程度低于骨隧道内。统计学结果:1.随时间推移,骨隧道内外各组移植物成纤维细胞和腱骨界面软骨细胞数均显著增加(P<0.05),细胞数排序为自体组>深冻组>冻干组。2.术后8周和12周时,骨隧道内和骨隧道外移植物成纤维细胞计数各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。术后8周排序为自体组>深冻组>冻干组、P<0.05;术后12周排序为深冻组>冻干组、P<0.05,深冻组和自体组无差异、P>0.05;术后24周时,各组间差异已无统计学意义(P>0.05)。3.术后8周和12周各组移植物成纤维细胞计数,骨隧道内>骨隧道外、P<0.05,有统计学意义;术后24周,各组骨隧道内外差异已无统计学意义(P>0.05)。4.术后8周和12周时,移植物腱骨界面软骨细胞计数各组间差异有统计学意义(P<0.05);术后8周排序为自体组>深冻组>冻干组、P<0.05,术后12周排序为自体组>深冻组、P<0.05,冻干组与深冻组无差异、P>0.05;术后24周时,各组间差异已无统计学意义(P>0.05)。根据本实验结果得出:1.ACL重建移植物细胞增殖由浅入深、逐步完成,8周到12周移植物内同时存在坏死和细胞增殖区域。2.异体冻干肌腱重建ACL早期生物学转化和腱骨愈合进程滞后于异体深低温冷冻肌腱和自体肌腱,在术后24周趋于同步。3.ACL重建移植物腱骨愈合从术后8周开始,腱骨界面逐步由间接愈合向直接愈合转化,术后24周转化还在进行中。4.骨隧道内外移植物表面细胞增殖和血管化有差异。骨隧道外为成纤维细胞,骨隧道内除成纤维细胞之外,在8周出现软骨细胞并逐渐增多;骨隧道外移植物血管化程度明显低于骨隧道内。