目的:肺纤维化发病率逐日升高,现代医学对于肺纤维化的治疗并没有特效的药物,而中医药对于治疗肺纤维有着独特的优势。近来有研究表明一些生长因子如血管内皮生长因子通过PI3K/Akt信号通路途径来激活eNOS释放一氧化氮,进而起到保护血管内皮,维持血管稳态,抑制肺纤维化的作用。本实验通过观察丹贝益肺汤对肺纤维化大鼠进食量、肺系数以及eNOS指标的影响,探讨丹贝益肺汤对肺纤维化大鼠治疗作用及作用机理推理丹贝益肺汤对血清eNOS浓度的影响。方法:将清洁级72只雄性SD大鼠随机分成六组,每组12只:模型对照组(D组)、甲泼尼龙阳性药对照组(J组)、正常对照组(K组)、丹贝益肺汤高剂量组(A组)、丹贝益肺汤中剂量组(B组)、丹贝益肺汤低剂量组(C组)。采用博来霉素雾化吸入式重复刺激模型。模型复制成功后第二天进行1次/日的常规灌胃给药。其中正常对照组与模型对照组给予生理盐水;丹贝益肺汤高、中、低剂量组分别按1.52g/100g、0.76g/100g、0.38g/100g体重的比例,根据大鼠体重换算丹贝益肺汤药液灌胃体积;甲泼尼龙阳性对照组给予0.42mg/100g的体重比例给予甲泼尼龙溶液灌胃。每三天记录一次进食量,统计各组进食量。各组大鼠在连续灌胃14天后通过从眼眶后静脉丛采集血液的方法采集3-4毫升的血液。给药28天取材。采用腹主动脉采血的方法收集血液,采血后,颈椎脱臼杀死大鼠,取出肺组织,用分析天平称重计算肺系数,分离左右肺脏,将右肺放在装有4%的多聚甲醛的广口瓶中固定24小时,将组织包埋并切片,常规脱水、组织透明、蜡浸、包埋、切片后进行HE和Masson三色染色。显微镜下观察纤维化程度和染色结果。使用酶联免疫法测定大鼠内皮型一氧化氮合酶,分别对标准品进行稀释和样品添加、水育、制备液体、洗涤、添加酶标试剂、再次水育洗涤、显色、终止和计算测量后eNOS的实际浓度。实验数据用SPSS统计软件17.0进行统计分析。多组试验采用单因素方差分析;两组间比较采用配对样本T检验。测试水平α=0.05,以p<0.05时差异有统计学意义。结果:第14天和28天各组血清eNOS用单因素变量ANOVA分析,P值<0.01,证明各组血清内皮型一氧化氮合酶的差异具有统计学意义。各组血清eNOS之间使用配对T检验两两比较,结果显示第14天模型对照组、丹贝益肺汤低剂量组、甲泼尼龙阳性对照组和正常对照组比较后差异具有统计学意义(P值<0.01);第28天甲泼尼龙阳性对照组、模型对照组、丹贝益肺汤高、中、低剂量组和正常对照组相比差异均具有统计学意义(P值<0.01);丹贝益肺汤各组肺系数相比甲泼尼龙组及模型对照组数值都较小,但相比正常对照组大,证明丹贝益肺汤各组肺纤维化有所恢复,且效果优于甲泼尼龙组;肺纤维化大鼠进食量下降,用药后各组进食量都有所恢复,但甲泼尼龙组进食量明显低于丹贝益肺汤各组。结论:1、丹贝益肺汤可以提高肺纤维化大鼠血清eNOS的表达水平。2、丹贝益肺汤可以降低肺纤维化大鼠肺系数,改善肺纤维化。3、病理观察丹贝益肺汤可以改善大鼠纤维组织增生,延缓肺纤维程度。4、甲泼尼龙可能会影响大鼠食欲,而丹贝益肺汤可以在一定程度上恢复肺纤维大鼠的食欲,增加进食量,其中高剂量组效果最明显。