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目的:采用定位候选和功能候选方法寻找肿瘤相关基因,并对其开展验证是目前常用的策略。筛选CDH17高表达的肝癌细胞株,通过RNAi技术靶向敲除CDH17,观察敲除该基因后所引起的生物学效应。本研究在此基础上,扩大肝癌组织样本对CDH17表达进一步验证,并研究其功能作用和表达失调机制,希望发现新的靶向治疗肝癌相关致病基因。方法:通过实时荧光定量-PCR,蛋白印迹法对四种肝细胞癌Hep G2、MHCC-97H、Huh-7、SMMC-7721中CDH17的表达情况进行检测筛选出CDH17高表达细胞株,利用质粒对目的细胞CDH17进行转染使基因沉默,实验分组分为CDH17-RNAi组,脂质体对照组,空白对照组。实时荧光定量-PCR,蛋白印迹法验证其表达,再通过Transwell细胞侵袭实验,CCK-8,平板克隆,流式细胞实验验证其细胞功能。结果:(1)半定量RT-PCR检测结果显示,四种肝细胞癌Hep G2、MHCC-97H、Huh-7、SMMC-7721中MHCC-97H相对表达量高于其他肝癌细胞株Hep G2、Huh-7、SMMC-7721,差异有统计学意义。Westen-bolt检测结果显示,四种肝细胞癌Hep G2、MHCC-97H、Huh-7、SMMC-7721中蛋白含量不同或不全相同,其中以MHCC-97H的相对表达量最高。(2)靶向CDH17的si RNA干扰结果显示:与脂质体组及空白对照组比较,CDH17-RNAi组MHCC-97H细胞中的CDH17在m RNA水平上的相对表达量均有降低。在蛋白表达水平上,与各对照组比较,CDH17-RNAi组MHCC-97H细胞中CDH17蛋白的相对表达量有所降低。在m RNA及蛋白水平上CDH17-RNAi组对MHCC-97H中CDH17的干扰效率都是最高,可用于后续实验;(3)RT-PCR及Westen-bolt检测结果显示,采用脂质体转染、筛选构建载体沉默MHCC-97H细胞株。体外实验显示,CDH17沉默能明显抑制MHCC-97H细胞增殖,减少细胞平板集落和软琼脂集落形成数目,降低细胞恶性生物学行为迁移和侵袭能力。CDH17-RNAi干扰组细胞其CDH17表达明显低于阴性对照组和空白对照组;沉默MHCC-97H细胞中CDH17基因后其表达明显降低及肝癌细胞的增值、迁移、侵袭能力降低,抑制肝癌的发生及发展。结论:在m RNA水平上,MHCC-97H细胞株中的CDH17相对表达量是最高的;在蛋白水平上,MHCC-97H细胞株中CDH17的相对表达量是最高的。CDH17基因在MHCC-97H沉默后能抑制肝癌细胞的增值,迁移及侵袭能力,抑制肝癌的发生发展。