HOXA7和NEK2及BMI-1表达与口腔鳞状细胞癌致癌机制的相关性研究

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目的:探讨HOXA7和NEK2及BMI-1蛋白表达和mRNA改变与口腔鳞状细胞癌中的发生及临床特征的关系,为临床口腔鳞状细胞癌的防治提供新的理论与治疗靶点。  方法:  1.利用基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)基因芯片GSE3524,使用R语言软件(R3.2.3)筛选差异基因(差异倍数≥2,P<0.01),利用STRING online工具筛选OSCC组织T4分期相对T2分期的上调差异基因(可信度≥0.4),筛选结果输入Cytoscape软件构建蛋白质相互作用网络图(Protein-Protein interaction network,PPI),利用ClusterONE对上调差异基因进行相互作用聚类分析,筛选核心功能差异基因,再次利用STRING online工具预测可能的上下游关系及信号通路。  2.收集口腔鳞状细胞癌组织标本60例,正常口腔黏膜组织60例为对照组,应用免疫组织化学检测HOXA7和NEK2及BMI-1蛋白在鳞状细胞癌组织中表达,应用Real Time-qPCR检测HOXA7和NEK2及BMI-1 mRNA表达,分析HOXA7和NEK2及BMI-1表达与口腔鳞状细胞癌患者临床特征之间的关系。通过Spearman等级相关分析和STRING在线分析工具,比较三种基因的相关性,探究其在口腔鳞状细胞癌致癌机制中的相关性。  结果:  1.通过生物信息学的分析预测,发现HOXA7,NEK2,BMI-1基因与MAPK1、MYC等基因间可能存在复杂的相互作用信号通路。  2.口腔鳞状细胞癌中HOXA7、NEK2及BMI-1蛋白表达明显高于正常对照组的(P<0.05)。HOXA7、NEK2及BMI-1蛋白表达与患者性别(P>0.05)和年龄(P>0.05)无关。在中分化和低分化鳞状细胞癌组(n=16)中HOXA7、NEK2及BMI-1蛋白表达明显高于高分化组(P<0.05)。Ⅰ期和Ⅱ期患者(n=38)中HOXA7、NEK2及BMI-1蛋白表达明显低于Ⅲ期和Ⅳ期患者(n=22)(P<0.05);Real Time-qPCR检测HOXA7、NEK2及BMI-1 mRNA表达在口腔鳞状细胞癌中明显高于正常对照组(P<0.05)。HOXA7、NEK2及BMI-1mRNA表达与患者性别(P>0.05)和年龄(P>0.05)无关。在中分化和低分化鳞状细胞癌组(n=16)中HOXA7、NEK2及BMI-1mRNA表达明显高于高分化组(n=44)(P<0.05)。Ⅰ期和Ⅱ期患者(n=38)中HOXA7、NEK2及BMI-1mRNA表达明显低于Ⅲ期和Ⅳ期患者(n=22)的(P<0.05);同时结果经相关分析后发现肿瘤组织中HOXA7、NEK2和BMI-1蛋白表达呈正相关关系(P<0.05)。  结论:  1.HOXA7,NEK2和BMI-1之间具有协同作用,可能导致OSCC肿瘤分化差和更晚的临床分期。  2.HOXA7,NEK2和BMI-1可能参与口腔鳞状细胞癌的发生和发展,为临床防治提供新的理论指导与实验基础。
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