【摘 要】
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拟南芥中有多个含有编码未知功能结构域DUF1644的基因,我们前期的实验发现其中一个基因UF2在种子萌发过程中响应于糖信号。G蛋白信号转导调节蛋白1(regulator of G-protein s
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拟南芥中有多个含有编码未知功能结构域DUF1644的基因,我们前期的实验发现其中一个基因UF2在种子萌发过程中响应于糖信号。G蛋白信号转导调节蛋白1(regulator of G-protein signaling 1,RGS1)为一种糖的感受器(sugar sensor),在感知糖的信号和信号转导过程中起重要作用。拟南芥RGS1(AtRGS1)属于七次跨膜蛋白,C端为由213个氨基酸组成的细胞质区域AtRGS1-box。生物信息学信息显示UF2可能与AtRGS1存在互作关系。本实验中,我们对UF2与AtRGS1间的相互作用进行了分析:(1)双分子荧光互补(BiFC)实验结果表明UF2与AtRGS1蛋白全长存在互作;(2)GAL4系统酵母双杂交(Y2H)、BiFC和Pull down实验表明UF2与AtRGS1-box互作;(3)Y2H实验结果表明UF2的DUF1644与AtRGS1-box不互作。采用同样的方法,我们还检测了另一个和糖信号有关的基因编码的蛋白即含有保守结构域DUF584的UF1与At RGS1的互作关系。BiFC实验表明UF1与AtRGS1全长蛋白互作;Y2H和BiFC实验表明UF1与AtRGS1-box之间存在互作;但Y2H实验表明UF1的DUF584与AtRGS1-box不存在互作。四次跨膜蛋白(tetraspanin,TET)家族在动物的生长发育过程中起重要作用,在植物中广泛分布,但对其功能研究较少。我们之前结果显示At TET6在种子萌发过程中响应糖信号。本研究对AtTET6的亚细胞定位进行了初步研究,烟草瞬时表达35S::AtTET6-GFP和拟南芥tet6突变体稳定表达At TET6pro::AtTET6-GFP的结果表明,AtTET6定位于内质网。
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