亚甲蓝对猪卵母细胞体外成熟及其孤雌胚发育的影响

来源 :贵州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yzjzs13141
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
亚甲蓝(Methylene blue,MB)是一种广泛应用于生物和医学领域的一种吩噻嗪盐,研究表明MB在线粒体中可以充当电子载体增强呼吸链功能,减轻细胞线粒体损伤、改善氧化应激和提高线粒体中ATP生成。目前尚未见亚甲蓝对生殖细胞保护作用的研究报道。因此,本研究旨在探讨亚甲蓝对猪卵母细胞体外成熟(In Vitro Maturation,IVM)和孤雌胚胎体外发育的影响,为进一步优化猪卵母细胞体外成熟体系提供理论依据。首先探讨IVM液添加不同浓度MB(对照组:0nM;试验组:10nM、50nM、100nM、200nM)处理40h-44h后对猪卵母细胞的影响。通过统计卵丘细胞扩展情况及卵母细胞第一极体排出率、MⅡ期卵母细胞孤雌激活后早期胚胎卵裂率、囊胚率,得出较优MB处理浓度。结果显示,体外成熟培养液中添加10nmol/L浓度MB组的卵丘细胞扩展分值(2.588±0.018)和卵母细胞第一极体排出率(69.73±3.56)显著高于0nmol/L对照组(2.372±0.029、60.13±3.31)(P<0.05);随后,孤雌激活早期胚胎发育后显示,10nmol/L处理组的卵裂率(84.24±1.7)和囊胚率(34.54±3.56)均显著高于对照组0nmol/L(75.71±3.24、25.69±3.85)(P<0.05),但其余各添加组和对照组的卵裂率和囊胚率相比无显著差异(P>0.05)。其次根据各浓度MB的处理效果,选择10nmol/L的MB浓度处理猪卵母细胞44h-46h,进一步探讨其可能的作用机制。结果发现:相比0nmol/L对照组,10nmol/L的MB处理组可以显著降低卵母细胞内活性氧的荧光强度(12.8±3.28VS 7.5±3.19,P<0.05);10nmol/L MB处理组可以显著提高卵母细胞内总谷胱甘肽含量(13.95±2.78 VS 11.86±1.28,P<0.05)和线粒体膜电位水平(13.42±3,98VS 20.7±2.67,P<0.05)。并在对卵母细胞母系基因的表达中发现,添加10nmol/L的MB处理组可以显著提高卵母细胞内CyclinB1、SHMT2、PGC1α的表达(P<0.05);对C-MOS、CDC2、ELASTIN的表达作用效果不显著(P>0.05)。研究结果表明:(1)在猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚发育阶段,添加10nmol/L亚甲蓝能有效促进卵母细胞的成熟及后续的孤雌胚胎发育。(2)亚甲蓝可能通过以下途径发挥作用以促进卵母细胞成熟:促进卵丘细胞增殖、扩展、降低细胞凋亡,维持正常的生理活动;清除卵母细胞内自由基,提高卵母细胞内氧化系统的抗氧化能力;提高卵母细胞内线粒体活性,使线粒体增加更多的生物合成,以便于提供卵母细胞成熟过程中所需的物质,提高其质量。
其他文献
背景气胸(pneumothorax)是威胁人类的重要疾病之一,临床治疗这类疾病的历史已长达180年,自1724年荷兰医学家Boerhaave (Boerhaave, hermann,1668-1738)在关于气胸的描述报告
高电荷态离子(HCI)与物质相互作用的研究不仅对极端条件下原子物理、离子-原子碰撞反应动力学等基础研究具有重要的意义,而且在生命科学、材料科学、新能源技术等领域具有重
目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者睡眠质量和焦虑之间的关系。方法采用多阶段整群随机抽样方法,应用自行设计调查表和匹兹堡睡眠质量指数量表、焦虑自
目前全站仪在工程测量和地质测量中已很普遍,尤其是极坐标法测量坐标,只有掌握全站仪的作业原理以及在进行极坐标法测量坐标时应该注意的细节,才能保证全站仪测量坐标数据的准确
目的探讨自发性急性硬膜下血肿的原因、发病机理及治疗方法。方法搜集近5年来自发性硬膜下血肿9例病人,分析发病原因以及通过保守和手术两种治疗方法获得的效果,得出相应的结论
自魏晋南北朝以来形成的官吏分途是中国官僚体制人事制度安排的基本特征。这一制度遗产至今仍然深刻地影响着国家治理的基本结构。随着现代社会的转型,传统的官吏分途演变成当
目的:探讨正颌术后内固定钛板拆除的动机,观察钛板钛钉周围组织覆盖的情况,从而了解患者正颌术后拆除钛板钛钉的最佳时间。方法:本研究收集自2015年至2017年于中国医科大学附
目的:研究芩柏复方烫伤膏对大鼠深Ⅱ度烫伤模型烫伤创面的保护作用。方法: SD大鼠100只,建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型,随机分为5组:模型对照组,芩柏复方烫伤膏组(0.4,0.2,0.1 g 浸膏/g生药),
船舶制造技术的发展是我国船舶工业发展的原动力。近几十年来,随着计算机科学技术的快速发展,计算机数值模拟方法也已经在船舶领域不断得到深化应用。目前船舶CAE前处理技术正朝着设计仿真集成化、智能化方向发展。结合船舶设计仿真一体化平台项目,本文系统研究了船舶CAE前处理系统中的关键技术,弥补了现有船舶CAE前处理系统中的不足,研究内容有:(1)基于现有的CAE前处理软件及船舶CAE行业软件的特点,研究比
文秘培养主要依靠学校,高职高专虽然重实践重技能,但目前企业对人才仍要求学历,而高等教育重理论轻实践,在实践技能上又有所欠缺,这就将文秘专业的高校毕业生置于尴尬的就业