鸭甲肝病毒1型弱毒疫苗对3型强毒在雏鸭体内复制及致病性的影响

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为探究DHAV-1疫苗弱毒对DHAV-3强毒在雏鸭体内复制及致病作用的影响,开展系列试验获得以下结果:1.基因1型DHAV(DHAV-1)疫苗弱毒和DHAV-3强毒在雏鸭体内分布规律将165只7日龄雏鸭,随机分为A、B、C、D四组。A组35只,每只肌注DHAV-1疫苗2羽份;B组50只,每只肌注2羽份DHAV-1疫苗和2000LD50DHAV-3强毒(与DHAV-1疫苗等拷贝数);C组50只,每只肌注2000LD50 DHAV-3强毒;D组30只为对照。肌注后1h、3h、6h、9h、12h、24h、48h、72h和96h每组取3只鸭,分别采集肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大脑、胰脏、胸腺、血液、哈德氏腺、法氏囊和十二指肠共11个组织器官,用定量RT-PCR检测样品中DHAV-1和DHAV-3含量。结果显示,DHAV-1弱毒主要在雏鸭肝脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊中增殖;接毒后1h在所有组织器官中检测到,病毒含量均为106copies/g左右,接毒后16h病毒含量下降,接毒后972h病毒含量逐渐上升并达到峰值(以肝脏中病毒含量最高为108.43copies/g),接毒后96h病毒含量下降。DHAV-3攻毒后1h即可在各组织器官中检测到,其中肝脏、脾脏和肾脏中病毒含量(分别为106.34、105.56和105.03copies/g)明显高于其他组织器官,攻毒后124h病毒含量逐渐上升,并于攻毒后2448h达到峰值(含量最高的三个器官依次是肝脏、脾脏和肾脏,分别为1011.15、1010.37和1010.30copies/g)。这表明DHAV-3强毒对雏鸭组织易嗜性强于DHAV-1疫苗弱毒,DHAV-3强毒在雏鸭体内增殖效率更高。2.同时感染DHAV-1疫苗弱毒对DHAV-3强毒在雏鸭体内复制的影响DHAV-3强毒在两组雏鸭体内增殖规律相似,绝大多数时间点各组织器官中DHAV-3含量无显著差异。表明DHAV-1疫苗对DHAV-3增殖仅存在微弱的影响。3.同时感染DHAV-3强毒对DHAV-1疫苗弱毒在雏鸭体内复制的影响DHAV-1疫苗弱毒在混合感染组雏鸭体内未呈现明显增殖,单独感染组中DHAV-1含量都显著高于混合感染组。这表明DHAV-3强毒可显著抑制DHAV-1疫苗弱毒在雏鸭体内增殖。4.DHAV-1疫苗弱毒对DHAV-3强毒致病性的影响DHAV-3强毒混合与单独感染雏鸭的临床症状和病变无明显差别,混合感染鸭的死亡集中在2430h,幸存鸭7296h肝损伤修复优于单独感染鸭,肝脏中IL-1β/6和IFN-α/β表达量显著高于单独感染鸭;IFN-γ在单独感染雏鸭更高;IL-2在612h混合感染鸭更高。因此,DHAV-1疫苗弱毒可能通过调节肝脏中细胞因子表达量,加快肝组织损伤修复进程,进而降低DHAV-3强毒对雏鸭的致病性。DHAV-1疫苗免疫1日龄雏鸭7d后感染DHAV-3强毒,保护率为10%30%。5.雏鸭日龄对基因3型DHAV(DHAV-3)强毒致病性的影响DHAV-3人工感染雏鸭,发现随雏鸭日龄增大其死亡率逐渐降低,1、4和7日龄雏鸭死亡率分别为100%、70%和40%。DHAV-3 QL株对4日龄雏鸭的LD50为10-4.13/0.2ml。
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