伏马菌素B1是一种主要由串珠镰刀菌、多育镰刀菌等产生的真菌毒素,主要污染玉米及其制品。本研究以抗FB1单抗为靶分子,采用噬菌体展示技术筛选到了FB1模拟表位,并建立了基于FB1模拟表位的Phage-ELISA和基于多肽-BSA抗原的间接竞争ELISA。研究内容如下:　　 1、FB1模拟表位淘选、鉴定及测序　　 以抗FB1单抗为靶分子,经三轮淘选获得了FB1模拟表位,经测序并翻译后得到三种序列:YGLPMLL、WELPTLA、FELPTLP,共有序列为X-X-L-P-X-L-X,X为任意氨基酸。　　 2、基于FB1模拟表位的Phage-ELISA分析法的建立　　 以含有FB1模拟表位的噬菌体替代FB1标品建立了Phage-ELISA,该法IC50为1.28 ng/mL,线性范围为0.33～5.1 ng/mL,最低检测限为0.21 ng/mL,批内变异系数为3.7％,批间变异系数为7.5%,玉米加标回收率为84.5～96.1%。　　 3、基于多肽-BSA抗原的间接竞争ELISA分析法的建立　　 采用戊二醛一步法制备了多肽-BSA抗原,并建立了基于多肽-BSA抗原的idc-ELISA,该法IC50为6.06 ng/mL,线性范围为1.77～20.73 ng/mL,最低检测限为1.18 ng/mL,批内变异系数为1.79%,批间变异系数为3.78%,玉米样本加标回收率为92.5～101.6%。　　 对合成多肽进行验证分析,结果表明模拟表位肽可不依赖噬菌体结构而与单抗结合,并具有特异性。　　 以合成多肽替代FB1标品进行idc-ELISA分析,并建立了竞争抑制曲线。对相同结合率对应的多肽与标准品间的浓度关系进行线性分析,结果表明两者相关性良好。