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目的:通过建立兔缺血再灌注损伤模型,观察缺血再灌注组(I/R group)和乌司他丁后处理组(ulinastatin post-conditioning group)对兔脊髓缺血再灌注损伤脊髓bcl-2及bax表达的影响。探讨乌司他丁对兔脊髓缺血再灌注损伤保护的相关机制。
方法:新西兰大白兔18只,随机分成三组,每组6只,假手术组(C组),缺血再灌注组(I/R组)和乌司他丁后处理组(U组)。氯胺酮麻醉后,分离肾动脉及腹主动脉,C组仅行麻醉及相关手术而不阻断腹主动脉;I/R组行腹主动脉阻断30min,于再灌注即刻经耳缘静脉注射5ml/kg的生理盐水;U组行腹主动脉阻断30min,再灌注即刻经耳缘静脉给予乌司他丁5.0×104u/kg(用生理盐水配制成浓度为1.0×104 u/ml)。观察再灌注后清醒即刻、再灌注后4h、再灌注后8h、再灌注后12h及再灌注后24h的兔后肢神经行为学改变。再灌注24小时后,取家兔L4以下脊髓标本,镜下观察HE染色改变、脊髓前角正常神经元计数、免疫组化检测bcl-2及bax的表达强度。
结果:⑴三组中I/R组家兔的后肢神经行为学评分明显低于C组和U组,且U组后肢神经行为学评分低于C组,有统计学意义(P<0.05)。⑵与I/R组相比,U组家兔脊髓组织镜下HE染色显示脊髓损伤较I/R轻,且脊髓前角正常神经元数明显多于I/R组,且有统计学意义(P<0.05);C组家兔脊髓HE染色镜下呈正常脊髓表现。⑶与C组比较,U组和I/R组家兔的bcl-2和bax表达均增多;与I/R组相比,U组bcl-2基因表达增加,bax基因表达相对减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论:脊髓损伤后,经静脉给予乌司他丁(ulinastatin)后处理可增加脊髓bcl-2基因表达,同时抑制bax基因表达,减轻脊髓组织凋亡,对脊髓缺血再灌注损伤有保护作用。