黄芪(Astragalus Membranaceus)为豆科植物,主要成分有多糖、皂苷、黄酮、氨基酸等,但以多糖含量最高。黄芪多糖具有增强动物机体免疫力、促进造血功能、抗脂质过氧化、抗肿瘤等多种活性作用。黄芪多糖的各种现有理化提取法的得率均较低,很难高效提取。利用微生物转化的方法不仅有提高黄芪多糖提取率的可能,而且还能将黄芪其他成分转化为多糖物质并增强其生物学活性作用。本研究通过对荷斯坦奶牛瘤胃液中的细菌进行分离、纯化和系统鉴定(包括形态学、生化和16SrDNA分子鉴定),建立系统发育树,获取有益菌菌种,并在不同浓度的黄芪药物培养基中对有益菌菌种进行驯化,获得驯化后的优势菌种,连续培养5-6代,评价各代中优势菌种对黄芪液中粗多糖的影响及自身浓度变化。研究获得的结果如下：在荷斯坦奶牛瘤胃液中成功分离纯化了30株细菌,菌株编号为LZPM-Y3、LZPM-O3、LZPM-O4、LZCC-O1、LZEF-Y4、LZBL-O1、 LZBL-3、LZBL-8、LZBL-9、LZBL-11、LZBL-12、LZBL-13、LZBL-17、LZBL-19、 LZBL-6-2、LZBL-1-1、LZB-Y5、LZBP-4、LZBP-5、LZBP-7、LZBP-10、LZBP-14. LZBP-16、LZBP-18、LZPM-Y2、LZBS-1-2、LZBS-Y1-2、LZBA-Y1-3、LZLB-2和LZLB-20。鉴定结果分别为奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)(3株)、纤维化纤维菌(Cellulosimicrobium cellulans)(1株)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)(1株)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)(11株)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)(7株)、浸麻芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)(1株)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)(2株)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens (Bacillus velezensis)(1株)、芽孢杆菌属(Bacillus sp)(1株)、赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillussp.)(2株)。30株细菌均提交到NCBI的GenBank数据库中,其中纤维化纤维菌(Cellulosimicrobium cellulans) LZCC-O1、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens (Bacillus velezensi))LZBA-Y1-3和赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)LZLB-2与LZLB-20为首次在牛瘤胃中发现。除2株奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)(LZPM-Y3和LZPM-O3)和1株芽孢杆菌属(Bacillus sp.)(LZB-Y5)为革兰氏阴性菌外,其余菌株均为革兰氏阳性；除纤维化纤维菌(Cellulosimicrobium cellulans) LZCC-O1为短杆菌和粪肠球菌(Enterococcus faecalis)LZEF-Y4为球菌外,其余各菌株的菌体形态均为杆状；除奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)、纤维化纤维菌(Cellulosimicrobium cellulans)及粪肠球菌(Enterococcus faecalis)无芽孢外,其余各菌株均有芽孢。实验测得地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)LZBL-11在黄芪培养液浓度为7%时,驯化到第6代菌株生长到14h时细菌浓度有最大0D257值0.94,选取此时的优势菌种传代培养,测得LZBL-11培养到第三代,黄芪培养液浓度为7%时,粗多糖增长平均百分比有最大值为56.7%,粗多糖浓度增加了1.55mg/L在CORREL中相关性计算阐明黄芪浓度为8%时,连续培养1-5代过程中LZBL-11菌液浓度与粗多糖浓度有最大相关性,其相关系数为0.922934。综上所述：本实验从瘤胃中分离得到的30株细菌均鉴定到了种属水平,并且从中选取的驯化优势菌株LZBL-11对于黄芪培养液中粗多糖含量的增加有显著效果,其自身浓度变化在一定传代次数内与粗多糖浓度变化呈有相关性。