论文部分内容阅读
细菌耐β-内酰胺类抗生素的主要耐药机制是其产β-内酰胺酶,导致含β-内酰胺环的抗生素（如青霉素、头孢菌素类抗生素）水解或活性降低。β-内酰胺酶主要包括超广谱β-内酰胺酶（Extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs）和碳青霉烯酶,目前三种主流的碳青霉烯酶按照Ambler分类分为A类（KPC）、B类（金属酶）以及D类（OXA-48型）。碳青霉烯类药物通常被认为是治疗泛耐药肠杆菌感染的最后手段,产碳青霉烯酶菌株的传播会严重影响临床治疗的有效性。宠物作为人类最亲密的伙伴,它们和人类健康的相关性不言自明,但目前国内关于宠物源产碳青霉烯酶大肠杆菌的报道较少,数据较缺乏,因此本研究对宠物源产碳青霉烯酶大肠杆菌耐药性进行初步研究,以了解宠物中携带碳青霉烯类耐药基因的大肠杆菌的流行情况,为防止耐药基因的传播提供依据。本研究于2015年7月到11月,从哈尔滨,扬州,重庆,武汉,成都和广州的宠物医院采得健康或患病的狗与猫肛拭子样品共129份。用含有美罗培南的选择性培养基筛选出对碳青霉烯类抗生素耐药的革兰氏阴性菌株,并进一步进行碳青霉烯类耐药基因的检测和测序,得到6株携带blaNDM-5的大肠埃希氏菌,其中,1株来自于扬州,3株来自于重庆,2株来自于广州。采用琼脂稀释法检测了6株blaNDM-5阳性的大肠杆菌对兽医临床常用几类抗菌药物:氨基糖苷类、β-内酰胺类、喹诺酮类、酰胺醇类、四环素类和磺胺类19种抗菌药的敏感性。结果为:六株blaNDM-5阳性大肠杆菌分离株表现出对头孢菌素类,碳青霉烯类药物和复方新诺明的耐药性,但对阿米卡星和替加环素敏感。值得注意的是,有两株对氨曲南、庆大霉素和黏菌素具有耐药性,PCR显示该大肠杆菌同时共同存在mcr-1基因。运用脉冲场凝胶电泳（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）、多位点序列分型（MLST）和接合转移实验、S1-PFGE和Southern blot等方法从垂直传播和水平传播两方面来研究blaNDM-5基因的传播机制。PFGE显示,blaNDM-5阳性大肠杆菌有5个不同的PFGE型,与之对应的MLST型也为5个;5株大肠杆菌的blaNDM-5基因都位于46kb的Inc X3型质粒上。NDM（New Delhi Metallo-β-lactamase,NDM-1）是由blaNDM基因编码的金属-β-内酰胺酶（metallo-β-lactamase,MBL）,属于B类碳青霉烯酶,NDM-5,为NDM-1的变异体,多数携带有该酶的菌株对包括碳青霉烯类在内的多类抗菌药物同时表现为高度耐药,因此由此类菌株引起的感染往往很难控制,给临床治疗带来很大困难,已引起世界性的公共卫生安全问题,现如今,宠物社会地位的提高使得人类和他们的宠物之间有了更频繁而密切的身体接触（例如,通过共享生活空间）并创造了人类和宠物交换微生物的机会,因此宠物中携带产碳青霉烯酶菌株的情况应引起重视,加强监督工作,防止耐药菌株的进一步传播。