第一部分共培养hAMSCs向肝样细胞分化体系建立与基因表达谱分析　　 目的：建立非接触式共培养诱导人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymalstem cells，hAMSCs)分化为人肝样细胞的培养体系，比较不同诱导体系与hAMSCs诱导前后基因及蛋白表达的差异。　　 方法：采用机械分离和二酶消化法培养hAMSCs，流式细胞仪术和免疫细胞化学鉴定hAMSCs，非接触式共培养和细胞因子诱导hAMSCs向肝样细胞分化，细胞形态学观察，糖原、油红染色及免疫细胞化学染色鉴定肝样细胞，ELISA法检测白蛋白含量，基因芯片检测各组细胞基因表达水平异同。　　 结果：第3、4代hAMSCs表达CD44、CD29、CD73、CD166和CD49d，高纯度表达波形蛋白，基本不表达CD34和CD45。第4代hAMSCs与正常肝细胞系HL-7702非接触式共培养，HGF和bFGF-2诱导培养hAMSCs，21d后，可见多角形细胞呈非典型的巢状排列，糖原染色阳性，油红染色可见较多脂滴存在，与未诱导hAMSCs比较，所诱导肝样细胞表达HNF-3β明显增高，而CK-18改变不明显，共培养诱导组肝样细胞表达甲胎蛋白增加。hAMSCs和诱导的肝样细胞，胞浆均表达白蛋白，但细胞培养液中未检测到白蛋白。在10类88个基因的检测中，发现共培养体系诱导的肝样细胞与未诱导的hAMSCs之间存在13个基因的表达差异；共培养和细胞因子诱导的肝样细胞之间也存在12个基因的表达差异；未诱导的hAMSCs、共培养和细胞因子诱导的肝样细胞均不表达WNT3A、NOTCH1、TERT、ANPEP、NGFR和CCNA2六种基因。　　 结论:非接触式共培养hAMSCs可成功诱导肝样细胞；共培养和因子诱导的肝样细胞与未诱导hAMSCs三者之间，存在着部分基因表达谱的差异，三者均不表达WNT3A、NOTCH1、TERT、ANPEP、NGFR和CCNA2六种基因。