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体内凝血过程主要有两种：内源性凝血途径和外源性凝血途径,内源性凝血途径是由凝血因子Ⅻ启动,外源性凝血途径起始于组织因子(Tissue Factor)暴露于血液。外源性凝血途径又称组织因子途径由组织因子作为启动因子。组织因子途径抑制因子(TFPI)是具有库尼兹结构的丝氨酸蛋白酶抑制剂,是外源性凝血途径的主要抑制因子之一,在动脉粥样硬化、弥散性血管内凝血(DIC)、血管再狭窄、血栓形成、肿瘤、炎症及感染性休克等疾病中具有潜在的治疗及应用前景。因此制备重组人组织因子途径抑制因子具有一定的临床价值。在众多表达系统中,利用酿酒酵母表达体系表达TFPI产量较低,发酵培养时产量约0.02 mg/L；昆虫细胞表达系统表达TFPI重组蛋白,其表达量只有0.21 mg/L；哺乳动物细胞表达体系所获得的重组蛋白,产量达2-6 mg/L,但成本昂贵,操作繁琐,周期长。本研究采用巴斯德毕赤酵母表达重组人组织因子途径抑制因子,于72小时表达量最高达到7.623lmg/L,重组TFPI对FXa的抑制率也在72小时最高为0.8918。不仅大大提高了重组蛋白的表达量,而且节约了生产成本。应用超滤透析,阴离子交换、凝胶过滤层析法分离纯化重组蛋白,纯度达90%,收率达55%,重组TFPI对FXa的抑制率为0.5341。本研究探索出低成本,高纯度,适用于工业化规模生产的纯化技术。将纯化的重组蛋白与免疫佐剂结合免疫日本大耳白兔并成功制备效价为1：32的多克隆抗体,为重组人组织因子途径抑制因子的功能研究及在相关疾病防治中的应用提供了良好的实验室基础。