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中华鼢鼠(Mospalax fontanieri)为鼹形鼠科、鼢鼠亚科、鼢鼠属动物,目前还没有该动物成纤维细胞建系及细胞生物学特性的研究。作为蒙古高原代表性动物遗传资源,本研究采集中华鼢鼠9种组织用于实验,其中气管、肺和剑状软骨3种组织成功建立成纤维细胞系并分析了这些细胞的生物学特性。主要实验方法是通过细胞计数法计算细胞的贴壁率、冻存前及复苏后的存活率、绘制细胞生长曲线;制备常规染色体标本分析染色体核型;采用DNA测序方法测定中华鼢鼠线粒体DNA的Cyt-b,D-loop,ND4基因序列,评价其进化地位。实验结果显示:中华鼢鼠气管、肺、软骨3种组织在体外条件下培养第3~4天出现成纤维样细胞,分别在培养第11天、第16天、第17天原代细胞90%以上汇合。3种组织来源体细胞均显示成纤维细胞特征,气管成纤维细胞贴壁能力最强,24 h贴壁率最高能达到98.10%,肺成纤维细胞与剑状软骨成纤维细胞贴壁能力较弱,24 h贴壁率最高,分别为95.28%和94.88%。3种不同组织来源成纤维细胞冻存成活率均显著下降,P4~P8气管成纤维细胞存活率为:冻存前98.92%~93.20%,复苏后91.57%~73.25%,P4~P8肺成纤维细胞存活率为:冻存前98.92%~89.33%,复苏后89.97%~70.21%,P4~P6剑状软骨成纤维细胞存活率为:冻存前98.52%~82.91%,复苏后88.23%~69.06%。3种成纤维细胞的生长曲线均呈“S”型,其中气管成纤维细胞增殖能力最强,在24孔板的每个孔中,其最大增殖数目为2.435×10~4个,肺成纤维细胞最大增殖数目为1.813×10~4个,剑状软骨成纤维细胞最大增殖数目为1.521×10~4个。核型分析结果显示,中华鼢鼠的成纤维细胞染色体数目为2n=62,30对为常染色体,形态类型为2st+28sm。第1对染色体最大为近中着丝粒染色体。其余28对染色体均为亚中着丝粒染色体,性染色体X为中部着丝粒染色体。系统发育树分析结果表明,鼢鼠来源于2个不同的母系祖先,且中华鼢鼠与高原鼢鼠的亲缘关系最近。综上所述,本研究成功建立了中华鼢鼠成纤维细胞建系技术及体细胞系,并揭示了该物种成纤维细胞的基本生物学特性,评价了中华鼢鼠的系统进化地位,为进一步研究其遗传及物种进化提供了重要的实验材料和参考依据。