解淀粉芽孢杆菌发酵花生粕及其分子机制初探

来源 :江西理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hulan2010
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花生粕是以去壳后的花生仁为原材料,经过提炼油脂后剩余的产物。主要用作动物饲料或植物肥料,被精深加工的却很少,导致产品附加值低,造成大量的资源浪费。本研究主要采用先碱性蛋白酶后解淀粉芽孢杆菌处理花生粕的方法来提高花生蛋白质的利用率。利用Illumina Hi Seq测序系统对解淀粉芽孢杆菌进行全基因测序、使用多种信息软件对解淀粉芽孢杆菌基因组进行COG注释和代谢系统分析,研究的主要结果如下:(1)对市场购买的13种酶进行初步筛选,分别设置各种酶的最适条件,以水解度作为指标,碱性蛋白酶处理花生粕的水解度最高,为45.6%。(2)通过单因素试验和正交试验对酶水解花生粕的各种因素条件优化,得到最佳的试验方案:底物浓度50g/L,p H值8.5,酶解时间24h,酶加量0.20%,酶解温度35℃。在此的条件下,花生粕的水解度为36.4%。(3)对实验室保存的8种菌株进行初步筛选,通过水解圈试验和菌落数计数试验,以透明圈与菌落的直径比和菌落数为指标,发现解淀粉芽孢杆菌分解花生粕能力强,菌落数最多,该菌株的透明圈与菌落的直径比为3.46,菌落数为9.55×1010CFU/ml。(4)通过单因素试验和正交试验对发酵试验的各种因素条件优化,在p H7.5,发酵温度30℃,转速150r/min的条件下,得到最优发酵条件:加菌量0.15%,发酵时间48h,工业葡萄糖添加量0.15%,发酵后的水解度为53.8%。(5)使用Diamond软件比对到Egg NOG数据库,解淀粉芽孢杆菌的3035个蛋白基因被划分为20个COG亚类,其中除了未知功能的基因数目最多外,解淀粉芽孢杆菌的氨基酸运输及代谢、转录和糖类运输及代谢也十分活跃,可能与蛋白质的翻译合成有关。(6)采用Diamond、hmmscan分析软件对比到CAZy数据库,解淀粉芽孢杆菌基因组的中共有127个CAZyme编码基因表达,该菌酶系较丰富,是一株优良的产酶菌株。使用anti SMASH软件分析,发现解淀粉芽孢杆菌基因组有16个次级代谢产物合成相关基因簇,其与具有抑制细菌和真菌等功能的各种基因簇相似,表明解淀粉芽孢杆菌也具有相似的功能特性。
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