【摘 要】
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目的:研究伊伐布雷定（Ivabradine,IVA）对D-gal诱导内皮细胞（HUVECs）衰老损伤的影响及机制的初步研究。方法:提取原代HUVECs并培养传代至3-6代进行试验;CCK8检测细胞活力筛选IVA干预时间和浓度,并进行分组为对照组（Control）、衰老组（D-gal）,IVA组（D-gal+IVA50μM,100μM,200μM）。SA-β-Gal染色法检测细胞衰老情况,并进行氧化
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目的:研究伊伐布雷定（Ivabradine,IVA）对D-gal诱导内皮细胞（HUVECs）衰老损伤的影响及机制的初步研究。方法:提取原代HUVECs并培养传代至3-6代进行试验;CCK8检测细胞活力筛选IVA干预时间和浓度,并进行分组为对照组（Control）、衰老组（D-gal）,IVA组（D-gal+IVA50μM,100μM,200μM）。SA-β-Gal染色法检测细胞衰老情况,并进行氧化相关指标ROS、MDA、SOD检测,Western-Blotting检测SIRT1、TGF-β1及p21在各组中的差异。结果:（1）CCK8结果表明,与Control组比,D-gal组细胞活力明显下降（P<0.01）;与D-gal组比,预处理12h中IVA组（50μM,100μM,200μM）对内皮细胞活力提高（P<0.01）。（2）衰老染色结果表明,与Control组比,D-gal组SA-β-Gal阳性率高（P<0.05）。与D-gal组比,IVA组中SA-β-Gal阳性率下降（P<0.05）。（3）氧化指标检测结果,与Control组比,D-gal组ROS、MDA水平升高,SOD水平下降（P<0.05）。与D-gal组比,IVA组中ROS、MDA水平下降,SOD水平升高（P<0.05）。（4）Western-Blotting结果提示:与Control组比,D-gal组中SIRT1表达降低,TGF-β1、p21升高（P<0.05）;与D-gal组比较,IVA 200μM组SIRT1升高,TGF-β1下降（P<0.05）。IVA100μM、200μM组p21表达显著下降（P<0.05）。结论:（1）D-gal可通过增加氧化应激、降低抗衰老蛋白表达等改变,降低细胞活力,促进血管内皮衰老损伤。（2）IVA可提高衰老内皮细胞活力,减少氧化应激,降低衰老染色阳性率,从而改善衰老内皮细胞损伤,因此对血管内皮细胞具有一定保护作用。（3）IVA增加衰老内皮中SIRT1表达,降低TGF-β1、p21表达,其保护机制可能与激活SIRT1/TGF-β1信号通路有关。
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