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目的:汉黄芩素(Wogonin,WOG)是从我国传统中药黄芩(Scutellariabaicalensis Georgi)中提取的黄酮类化合物。本文旨在研究汉黄芩素在体外对人肝癌细胞株HepG2 增殖的影响并探讨其可能的分子作用机制。
方法:以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,应用MTT 法检测汉黄芩素对其增殖的影响;荧光显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪分析细胞凋亡率和线粒体膜电位变化;Western blot 检测细胞中相关蛋白的表达;荧光显微镜测活性氧水平变化。
结果:
(1)0~200μmol/L的汉黄芩素对HepG2细胞的增殖有显著抑制作用,并呈剂量和时间依赖性。48 h的IC50是115.14μmol/L。
(2)荧光显微镜观察结果表明,经汉黄芩素处理48 h后,细胞发生染色质浓缩,核碎裂以及凋亡小体形成等形态学变化。
(3)流 式细胞仪检测结果显示,汉黄芩素作用细胞后,细胞凋亡率显著增加,线粒体膜电位显著下降。
(4)Western blot 结果表明,汉黄芩素能够活化caspase-3和caspase-9,对caspase-8 无明显作用;上调抑制生长的蛋白因子Bax的表达水平,下调促进生长的蛋白因子Bcl-2蛋白表达水平,促进线粒体释放Cytochrome C。
(5)荧光显微镜和酶标仪检测结果显示汉黄芩素作用8 h,细胞中活性氧水平前4h上升,后4 h下降。
结论:汉黄芩素能够显著性的抑制HepG2的增殖。细胞ROS水平上升造成线粒体氧化损伤促进Cytochrome C的释放活化caspase-9,通过线粒体信号通路诱导凋亡可能是其重要的的作用机制。