Wnt信号在胚胎发育和肿瘤发生过程中发挥极其重要的作用。虽然Wnt信号由细胞膜上受体Frizzled(Fz)传导至细胞质中的分子机制目前尚不清楚，但是Dishevelled(Dvl)蛋白被认为是参与这一过程非常重要的信号分子，该蛋白主要由DIX、PDZ和DEP三个结构域组成。以前的研究发现，表达单独DEP结构域即可以抑制Dvl上游经典Wnt信号的传递，这意味着DEP可能与Dvl上游信号分子，如受体之间存在直接的相互作用，而该结构域的一个KM(434位Lys变为Met)点突变形式却显著的削弱了这一功能。 在本论文第一部分中，我们以Dvl-1的DEP结构域作为靶标，利用噬菌体展示肽库技术，通过四轮的富集筛选，并且以低活性的KM突变形式作为对照，筛选得到一系列能够与DEP特异性结合的表达有特定肽段的阳性克隆。通过序列测定，从中得到了一个高丰度12肽：TFWDDGWLLLPR(P12)。组成氨基酸性质分析表明这些肽段基本都含有色氨酸以及酸性氨基酸，这与前人报道的DEP的表面活性位点存在明显的互补性，也为相互作用的存在提供了分子结构依据。(DEP结构域的KM突变减少了表面活性位点中一个碱性氨基酸，可能从而导致相互结合大大减弱。)应用GSTPull-down结合实验证明，GST融合的12肽在细胞内与DEP存在直接相互作用，其与DEP-KM的结合力则要比DEP弱很多。另外通过LEF报告基因检测P12对经典Wnt信号的影响中发现，P12能够抑制Dvl上游Wnt3a信号的激活，但并不影响Dvl-1本身以及△N-β-Catenin对下游的激活。 在本论文的第二部分中，我们研究了Dvl-1的各个结构域(DIX、PDZ和DEP)在经典Wnt信号转导途径以及Dvl-1转膜过程中的功能。DEP(在以前已有报道)和DIX结构域都能够抑制Wnt-3a介导的信号激活以及细胞浆中游离β-Catenin的积累，PDZ结构域以及DEP的功能突变体DEP-KM对经典Wnt/β-Catenin信号基本没有影响。当DIX、PDZ、DEP以及DEP-KM结构域与Fz-7共同转染时，只有DEP结构域，而不是DIX、PDZ、DEP-KM结构域同野生型Dvl-1一样与Fz-7一起定位在细胞质膜上。DEP结构域的这种转膜定位与同野生型Dvl-1的膜定位存在明显的竞争关系。以上结果清楚地表明：DEP结构域是Dvl-1上膜接受上游Wnt信号所必需的。