前列腺癌差异核基质蛋白的筛选研究

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目的:本研究旨在应用荧光双相电泳结合质谱技术建立人前列腺癌和前列腺良性增生的核基质蛋白差异表达图谱并进行鉴定和分析;为临床找寻前列腺癌的诊断和预后标志物奠定实验室基础。材料和方法:1、应用细胞荧光免疫技术特异标记BPH-1、LNCaP、PC-3三种细胞中的AnnexinⅡ和GRP78蛋白;分析蛋白的细胞定位;2、硫酸铵沉淀法提取组织的核基质蛋白(NMPs),荧光差异双向电泳技术(DIGE)进行蛋白质分离;4、Typhoon9410多功能成像系统扫描双向电泳图谱,DeCyder5.0软件分析,对差异表达的蛋白点进行基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析。结果:1、AnnexinⅡ在BPH-1和LNCaP细胞中主要定位于胞浆和细胞膜上,且均呈现弱阳性表达,在PC-3细胞中强表达并且细胞核中表达增多;2、GRP78在BPH-1细胞中大部分表达于细胞浆内,少量表达在细胞核中,在LNCaP和PC-3的细胞核和细胞浆中均可见;3、成功获得了人前列腺癌组织和前列腺良性增生组织的核基质蛋白表达差异图谱;4、获得到24个有统计学意义的差异蛋白点,其中16个蛋白点在前列腺癌组织中表达下降,8个蛋白点在前列腺癌组织中表达上调;5、鉴定差异蛋白大致可分为蛋白酶类、肌动蛋白、与细胞增殖相关的各种因子等类别。结论:1、AnnexinⅡ和GRP78的差异表达可能与前列腺癌细胞的不同分化程度有关;2、人前列腺癌和人前列腺良性增生组织的核基质蛋白组分存在显著差异。
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