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中性蛋白酶A作为微生物酶制剂,在食品、畜牧、皮革加工和医药行业具有广泛的应用。枯草芽孢杆菌(B.subtilis)能够表达和分泌胞外中性蛋白酶A(NprE),但是由于细胞固有的基因表达调控机制的限制,野生型B.subtilis在生长过程中,中性蛋白酶A的表达和分泌量有限,不能满足实际应用的需要。本研究采用基因操作技术,初步构建了能够过量表达和分泌中性蛋白酶A的重组B.subtilis,并对重组菌的中性蛋白酶A发酵培养基进行了优化。将B.subtilis中性蛋白酶A基因nprE的编码序列和终止子序列,