人类脂源性干细胞对大鼠阴茎海绵体神经损伤后勃起功能障碍的作用

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目的:勃起功能障碍(Erectile dysfunction,ED)是全球范围内一种常见的男科疾病,是指性刺激下阴茎无法达到或维持足够的勃起来完成满意的性生活,严重困扰着患者及其家庭。随着前列腺癌发病率不断上升,前列腺根治术常伴有阴茎海绵体神经(cavernous nerves,CNs)损伤,由此所带来的ED也呈现相应的增加,治疗ED常用的五型磷酸二酯酶抑制对于这类患者疗效甚微,临床上也没有太多有效的办法。随着干细胞(stem cells,SC)技术的不断发展,为前列腺根治术CNs损伤的ED患者带来了新的希望。在众多的SC中脂源性干细胞(adipose derived stem cells,ADSC)由于其本身的特性而成为现阶段研究的不二之选。本研究旨在探索人类源性ADSC在CNs损伤ED中的作用。方法:共入组10例术后病理诊断为肾囊肿的患者,术中收集肾周的脂肪组织,通过I型胶原酶消化法,分离提纯ADSC,采用流式细胞学技术鉴定ADSC。将30只8周龄雄性SD大鼠随机分为三组,Sham组只进行破皮处理,ADSC注射组和CNs组在显微镜下分离出大鼠的双侧CNs,用显微器械钳夹双侧CNs 2分钟,建立CNs受损的ED模型。ADSC注射组通过海绵体注射20μl的ADSC,其中含有细胞5×105;CNs组通过海绵体注射20μl的PBS。处理前和八周后分别使用生理记录仪测量最大阴茎海绵体内压(intracavernosal pressure,ICP)和平均动脉压(meanarterial pressure,MAP),并采用western-blot检测阴茎组织蛋白eNOS和nNOS的表达。结果:实验成功提取人类ADSC,在倒置显微镜下观察到存活的细胞贴壁,形态呈三角形、梭形、纤维样,单层生长,流式细胞学检测结果显示人类脂源性干细胞表面CD29、CD44、CD90、CD105表达阳性,CD34、CD45表达阴性。注射处理八周后在电刺激CNs的情况下,检测结果显示Sham组最大ICP值为85.7±2.6 cmH20,显著高于 CNs 组最大 ICP 值 37.2±7.4 cmH20(p<0.001),CNs组显著低于 ADSC 组最大 ICP 值 81.2±3.7 cmH20(p<0.001)。Sham 组与 ADSC组差异不具有统计学意义(p>0.05)。Sham组ICP/MAP值为75.4±5.9%,显著高于 CNs 组 ICP/MAP 值 39.1±4.0%(p<0.001),CNs 组显著低于 ADSC 组 ICP/MAP值72.3±3.5%(p<0.001)。Sham组与ADSC组差异不具有统计学意义(p>0.05)。相对于Sham组和ADSC组,CNs组eNOS和nNOS蛋白表达明显下调。结论:实验从人类肾周脂肪组织中成功的提取并培养得到了人类ADSC,经流式细胞技术鉴定为ADSC,人类ADSC对大鼠阴茎海绵体神经损伤后勃起功能障碍有明显的改善作用。为临床治疗前列腺根治术后的ED治疗提供了新的思路。
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