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目的:壬基酚(nonylphenol,NP)是一种典型的持久性有机污染物(persistent organic pollutants,POPs)。NP既可以通过血脑屏障,也可以通过胎盘屏障和血乳屏障。胎儿、婴儿和儿童处于神经发育的关键和敏感期,NP暴露可能对其中枢神经系统(central nervous system,CNS)造成严重的影响。现已证明NP暴露可损害小脑发育并导致与小脑密切相关的神经行为学和运动功能缺陷。小脑颗粒细胞(granular cells,GCs)是小脑中数量最多的神经元。它在维持学习、运动和记忆功能中有重要作用。小脑的正常发育需要颗粒细胞的前体--颗粒细胞前体细胞(granule cell precursors,GCPs)的精确增殖,因此,我们建立了大鼠孕哺期NP暴露的模型,探究了NP暴露对仔鼠小脑GCPs增殖的影响,并研究了可能的机制。实验方法:将NP溶解在玉米油中,每天以0,10,50或100 mg/kg/day的剂量从母鼠妊娠第0天(gestational day 0,GD0)到仔鼠出生后21天(postnatal day 21,PND21)对母鼠进行灌胃染毒。在PNP7,PND14和PND21测量仔鼠小脑重量的变化;对仔鼠小脑切片进行Nissl染色以分析小脑面积改变;对仔鼠小脑外颗粒层(external granular layer,EGL)进行免疫荧光染色,观察PNP7,PND14和PND21时GCPs增殖及EGL厚度的变化;使用免疫荧光染色观察PND21时GCs数量的变化。采用Western blot检测仔鼠小脑中调控GCPs增殖的Notch2通路中主要成员Notch2、Notch胞内域(Notch intracellular domain,NICD)、发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,HES1)和配体Jagged1的蛋白表达。结果:结果表明,与对照组相比,NP处理组的仔鼠小脑重量呈增加趋势:尽管孕哺期NP暴露并没有显着改变PND7或PND14的小脑重量,但与对照组相比,PND21时50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组的小脑重量显著增加(p<0.05)。与此相符的是,在PND21时50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组仔鼠的小脑面积显著大于对照组仔鼠(p<0.05)。PND21时NeuN的免疫荧光染色结果表明,与对照组相比,50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组仔鼠小脑内颗粒层(internal granule cell layer,IGL)的厚度显著增加(p<0.05)。PND7和PND14时GCPs标记物Pax6的免疫荧光染色结果表明,与对照组相比,50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组仔鼠小脑PAX6~+细胞显著增多(p<0.05)。PND7和PND14时Pax6与增殖标志物PCNA的免疫荧光染色结果表明,与对照组相比,50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组仔鼠小脑EGL中表达PCNA的PAX6~+细胞显著增加(p<0.05)。PND7和PND14时,50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组的PCNA+细胞数与PAX6+细胞数的比值显著高于对照组(p<0.05)。此外,PND7和PND14时50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组的EGL的厚度显著增加(p<0.05)。PND7时仔鼠小脑的免疫印迹试验结果表明,与对照组相比,所有NP处理组Notch2蛋白表达水平均显著增加(p<0.05);50 mg/kg和100 mg/kg NP处理组中NICD和HES1的蛋白水平显著增加(p<0.05);100 mg/kg NP处理组中Jagged1水平的显著增加(p<0.05)。PND14时仔鼠小脑的免疫印迹试验结果表明,与对照组相比,50mg/kg和100mg/kg NP处理组中Notch2、NICD、HES1和Jagged1的表达均显著增加(p<0.05)。结论:孕哺期NP暴露会导致发育中小脑的GCPs过度增殖,而Notch2信号通路的异常激活可能与GCPs过度增殖有关。