论文部分内容阅读
彗星试验(Comet assay)又称单细胞凝胶电泳试验(Single Cell Gel Electrophoresis),是一种快速、灵敏的检测单个细胞DNA断裂的新技术,由于其具备快速、灵敏、需样品量少等优越性,应用前景十分广泛。为了在本实验室建立彗星试验方法,利用该方法检测烷基酚类化合物对海洋生物血淋巴细胞的DNA损伤,并且扩展该方法在海洋生态风险评价中的应用,进行了本项实验。本文研究了壬基酚(nonylphenol,NP)、丁基酚(butylphenol,BP)、辛基酚(octylphenol,OP)和双酚A(bisphenol A,BPA)等酚类化合物对海洋贝类血淋巴细胞DNA的损伤,共设5个试验剂量,分别为0、0.025、0.10、0.25、1.00mg/L,试验进行24h和48h后,分别采集血淋巴细胞进行单细胞凝胶电泳试验。本研究包括以下几部分:首先采用壬基酚对海湾扇贝(Argopecten irradians)进行了活体和离体的染毒实验,其后对牡蛎(Crassostrea gigas)、文蛤(Meretrix meretrix Linnaeus)进行了体内染毒实验,通过对三种贝类染毒后血淋巴细胞的彗星试验结果进行了遗传毒性分析。结果表明:不论活体还是离体试验,从血淋巴细胞的彗星图和试验数据分析结果可以看出,随着壬基酚溶液浓度的增大,彗星尾长和细胞迁移率均相应增加,说明壬基酚溶液剂量越大,对贝类血淋巴细胞DNA的损伤越严重,且壬基酚浓度与贝类血淋巴细胞DNA损伤程度之间存在着明显的剂量-效应关系。结果还表明NP对贝类的遗传毒性风险浓度为0.025mg/L,高于此浓度将会对贝类的DNA结构稳定性造成不同程度的破坏而致突变、致畸变和致癌变,同时由于人类的食物摄取可能会影响到人类的健康。数据分析结果同时表明,在相同浓度的壬基酚处理组中,扇贝、牡蛎和文蛤血淋巴细胞的破坏率和迁移长度存在种间差异,这可能是由于这三种贝类对NP的免疫程度不同所致,但关于海洋生物对外界干扰因素存在不同免疫力的具体机制以及它们之间的差别,目前国内外的研究还不多见,具体研究还有待进一步的开展。本文第二部分研究了不同的酚类化合物(丁基酚、辛基酚和双酚A)对海湾扇贝血淋巴细胞DNA的损伤状况,彗星试验结果表明:随着丁基酚、辛基酚和