背景与目的：肺癌是对人类威胁最大的疾病之一，死亡率居各肿瘤疾病之首，而侵袭转移是导致肺癌患者死亡的重要原因之一，因此对肺癌侵袭转移特性的研究对于改善肺癌治疗效果具有重要的意义。尽管相关研究很多，但是肺癌的侵袭机制仍然没有被完全揭示出来。目前用于评价侵袭的模型主要有体外模型和体内模型两种。体外模型主要用于肿瘤侵袭能力的初步研究；而体内模型具有能够模拟体内微环境以及肿瘤侵袭生物学行为的特点，是肺癌侵袭研究的主要方法。本研究通过利用肺癌细胞注入裸鼠爪垫内构建动物爪垫侵袭模型；结合形态学观察以及侵袭相关蛋白的检测建立一套侵袭评估标准，评价肺癌细胞的体内侵袭能力。方法：将不同浓度H446肺癌细胞注入裸鼠爪垫内构建肺癌动物爪垫侵袭模型，通过形态学观察评估模型是否建立成功；在此基础上利用具有不同转移能力的肺巨癌细胞95C（低转移）和95D（高转移）建立裸鼠爪垫侵袭模型，结合组织形态学观察以及侵袭相关蛋白IV型胶原蛋白及CD31的检测建立侵袭分级评估标准，根据评估标准评价两种肺癌细胞侵袭能力的差别并分别利用侵袭相关蛋白检测加以验证。结果：1．H446细胞注入爪垫内可成瘤，成瘤的最适细胞量为100万/部位，成瘤率为100%（20/20）。通过肿瘤组织HE染色观察到肿瘤细胞侵袭肌肉现象，确定裸鼠爪垫侵袭模型构建成功。2．具有不同转移能力的95C细胞（低转移）及95D细胞（高转移）分别注入裸鼠爪垫内均能成瘤，成瘤最适细胞量均为200万/部位，成瘤率均为75%（9/12），95C瘤块重量大于95D瘤块，两者平均重量分别为0.080±0.019（g），0.052±0.018（g），具有统计学差异（P<0.05）；参考Tsubota Y等膈肌侵袭分级标准以及高进等爪垫侵袭分级标准，结合组织镜下HE染色观察及侵袭相关蛋白的检测建立新的侵袭标准；利用该侵袭分级标准对两种肿瘤组织分别行侵袭分级显示95D细胞的体内侵袭能力较95C细胞强，两者具有统计学差异（P<0.05）。对两种组织分别行侵袭相关蛋白IV型胶原蛋白及CD31检测发现，95C细胞及95D细胞所致肿瘤组织的IV型胶原蛋白表达均不完整连续，但95C肿瘤组织中IV型胶原蛋白表达量相对较多。CD31检测镜下观察计算微血管密度（MVD）显示95C肿瘤组织新生血管数量较95D肿瘤组织少，两者具有统计学差异（P＜0.01）。根据上述研究表明95D细胞的体内侵袭能力较95C细胞强。结论：1.利用H446细胞成功构建爪垫侵袭模型；2.参考Tsubota Y等膈肌侵袭分级标准以及高进等爪垫侵袭分级标准，结合镜下观察及侵袭相关蛋白的检测建立新的侵袭分级标准，并被证实具有较好的可靠性；3.利用具有不同转移能力的肺巨癌细胞系95C（低转移）和95D（高转移）成功建立动物侵袭模型；利用上述侵袭分级标准进行侵袭分级并通过侵袭相关蛋白检测验证显示95D细胞体内侵袭能力较95C细胞强。摘要与目的：CCNY (又称Cyclin Y)是一种细胞周期蛋白，它在细胞周期调控及转录过程发挥重要的作用，近期研究发现其可能与肺癌增殖等相关。本实验室前期研究发现CCNY在体外能够促进肺癌细胞的侵袭，然而在体内能否促进肺癌的侵袭还不得而知。为了探讨CCNY在体内微环境中能否促进肿瘤细胞的侵袭，本研究通过将已构建的3种不同的肺癌细胞（95D、95D-CCNY-NC、95D-CCNY-KD）接种于裸鼠爪垫皮下构建动物侵袭模型，探讨CCNY在肺癌体内侵袭过程中的作用。方法：利用已经构建的3种不同的肺癌细胞系（95D、95D-CCNY NC、95D-CCNY-KD）建立爪垫侵袭模型；根据已建立的侵袭评估标准进行侵袭分级,评估三者侵袭能力的差别；并对三种肿瘤组织分别行侵袭相关蛋白的检测进行验证，从而探讨CCNY在体内能否促进肺癌侵袭。结果：将已经构建的3种不同的肺癌细胞（95D、95D-CCNY-NC、95D-CCNY-KD）分别注入裸鼠爪垫内，发现均能成瘤，成瘤细胞数为200万/部位,成瘤率分别为91.67%，83.33%，41.67%；95D及95D-CCNY-NC肿瘤生长速度较快，95D-CCNY-KD生长速度较慢。对三种瘤块组织行CCNY免疫组化检测镜下发现95D及95D-CCNY-NC瘤块组织内CCNY表达量较高，而95D-CCNY-KD组织内CCNY表达为阴性。三种瘤组织切片根据已构建的侵袭评估标准分别进行侵袭分级，发现95D-CCNY-KD细胞体内侵袭能力较95D及95D-CCNY-NC细胞弱，且具有统计学差异（P<0.05）；并通过侵袭相关蛋白IV型胶原蛋白及CD31的检测验证了95D-CCNY-KD细胞体内侵袭能力较95D及95D-CCNY-NC细胞弱；根据上述研究显示CCNY能够促进肺癌在体内的侵袭。结论：1.CCNY能够促进肺癌细胞在体内的侵袭;2.CCNY有可能成为抑制肺癌侵袭的药物靶点。