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目的:动态观察干扰素-γ(interferon gamma,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor alpha,TNF-α)在卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystis carinii pneumonia,PCP)大鼠血清中的表达情况,探讨二者可否作为PCP感染严重程度的指标,为PCP的免疫发病机制和防治提供实验依据。
方法:(1)用地塞米松磷酸钠注射液腹股沟皮下注射SD大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎大鼠动物模型。(2)动物分组:正常对照组;感染6wk组;感染7wk组;感染8wk组。(3)肺组织印片六亚甲基四胺银染色观察卡氏肺孢子虫(Pneumocystis carinii,Pc)包囊;肺组织切片苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察其病理变化。(4)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清中的IFN-γ含量;放射免疫测定法检测大鼠血清中的TNF-α含量。
结果:(1)随用药时间的延长,感染组肺组织印片Pc包囊越多,症状及病理改变越重,体重逐渐减轻:(2)各感染组与正常对照组比较,血清中IFN-γ、TNF-α含量均明显降低(P<0.05);(3)随用药时间的延长,各感染组大鼠血清中IFN-γ、TNF-α含量逐渐降低(P<0.05)。
结论: (1)正常对照组大鼠与模型组大鼠分隔不同动物室饲养,可降低前者受感染的风险;严格的动物室消毒、管理可降低实验动物病死率。(2)各感染组大鼠血清中IFN-γ、TNF-α表达水平均明显低于正常对照组,提示二者参与了PCP的发病过程;随用药时间的延长,各感染组大鼠症状及病理改变越重,血清中IFN-γ、TNF-α含量也逐渐降低,提示PCP的发生、发展可能与血清中IFN-γ、TNF-α含量逐渐降低有关。因此,血清IFN-γ、TNF-α水平可视为PCP感染严重程度的指标。