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目的:以醋酸铅诱导PC12细胞损伤为模型,探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)介导的ROCK信号通路在人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1,Gs-Rb1)保护醋酸铅诱导神经细胞PC12损伤中的作用。方法:第一部分将体外培养的PC12细胞用不同剂量的醋酸铅染毒后,筛选出可产生明显损伤PC12细胞的醋酸铅低、中、高剂量组,各药物作用于细胞24 h后,采用噻唑蓝还原法测定药物对细胞增殖率的影响,乳酸脱氢酶LDH释出率试剂盒检测PC12细胞的损伤程度,采用试剂盒检测细胞中丙二醛(malondialdehvde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平,DCFH-DA探针染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,采用ATP试剂盒荧光素酶法来测定细胞内ATP含量,倒置相差显微镜细胞形态学的变化,Hoechst 33342染料检测细胞的凋亡情况,以及免疫荧光染色法检测HIF-1α、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶-2(rho associated coiled coil forming protein Kinase-2,ROCK-2)在细胞内的表达,免疫印迹法检测细胞HIF-1α、Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶-1(rho associated coiled coil forming protein Kinase-1,ROCK-1)、ROCK-2、线粒体内细胞色素C(mitochondrial cytochrome C,Cyto C)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9(cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)以及Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2Associated X Protein,Bax)的表达。然后再采用小RNA干扰HIF-1α,观察对细胞中HIF-1α、ROCK-1,ROCK-2蛋白表达的变化。第二部分选择合适剂量的醋酸铅处理PC12细胞造成细胞损伤模型,同时给予不同剂量的人参皂苷Rb1或HIF-1α特异性抑制剂二甲基雌二醇(2ME2)预处理,采用以上相同方法,检测细胞增殖率、LDH、SOD、ROS、ATP、细胞形态学变化、细胞凋亡,以及HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2、Cyto C、Caspase-9、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白等指标的变化。结果:PC12细胞随着醋酸铅剂量的增大损伤加重,并呈现出剂量依赖性。同时,损伤的PC12细胞内氧自由基含量明显提高,轴突缩短,细胞活力下降,皱缩变圆出现凋亡。此外,醋酸铅可使PC12细胞HIF-1α,ROCK-2表达上调,并从胞质向细胞核聚集转位;同时使ROCK-1、ROCK-2、Cyto C、Caspase-9及Caspase-3的表达上调,Bax/Bcl-2的表达比例也显著增加;HIF-1αsi RNA转染细胞后,细胞中HIF-1α,ROCK-1,ROCK-2的蛋白表达水平下降。人参皂苷Rb1及HIF-1α抑制剂2ME2可减轻醋酸铅对PC12细胞损伤的程度,下调HIF-1α、ROCK-1、ROCK-2、Cyto C、Caspase-9、Caspase-3以及Bax/Bcl-2的表达。结论:醋酸铅诱导PC12细胞损伤与HIF-1α介导的ROCK信号通路激活,胞内氧自由基增加及线粒体功能损伤有关;人参皂苷Rb1和HIF-1α抑制剂2ME2能够减轻醋酸铅致PC12细胞的损伤程度,减少细胞凋亡,其作用机制可能与抑制HIF-1α介导的ROCK信号通路有关。