目的:本研究探讨不同种植体表面处理在早期骨结合方面有无差异,实验组使用的种植体为微弧氧化(MAO)处理,其表面具有微纳米双重结构TiO2微弧氧化膜层,对照组为喷砂-酸蚀(SLA)表面处理以及无表面处理的纯钛种植体,为该新型TiO2膜层提供生物学评价,同时为微弧氧化方法在生物医用钛材料的应用提供实验依据。方法:本研究的实验对象为12-16月龄的健康杂种犬6只,全麻下操作,拔除所有实验犬的双侧下颌第二(P2)第三(P3)第四(P4)共计6颗前磨牙。种植手术于拔牙创愈合3个月之后进行,根据种植体不同表面处理分为A组(无表面处理种植体)、B组(SLA表面处理种植体)以及C组(MAO表面处理种植体)。在两侧缺牙区测量好术区范围,设计每只犬每侧植入2颗种植体,根据随机数字表方法,对每组各8颗的种植体进行编号植入,共24颗种植体。愈合一个月后处死,于处死前14d及4d分别注射钙蓝绿素和茜素红,进行双色荧光染色标记。6只实验犬处死后,进行取材和标本的固定。标本收集后进行大体观察、影像学观察、激光共聚焦显微镜以及光学显微镜观察。其中影像学观察除了拍摄常规的X线片,还使用Micro-CT扫描重建,分析三组种植体周围骨组织骨小梁的骨体积分数(BVF)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨小梁厚度(Tb.Th)等骨小梁形态学参数。然后制做带种植体的骨磨片,通过一定波长的光谱照射后,在激光共聚焦显微镜下通过双色荧光标记法测量骨矿化沉积率(MAR)。骨磨片选取甲苯胺蓝染色后使用光学显微镜观察,测量各组的种植体周围骨面积(BA)和种植体-骨结合率(BIC)。最后利用统计学软件对所得数据进行统计学分析。结果:一、大体观察实验犬无死亡情况发生,a组在种植体植入后发现一颗种植体脱落,其余23颗种植体创口愈合良好,周围黏膜质地、色泽正常,创口周围无软组织充血肿胀等炎症反应。实验犬处死后,去除多余软组织后,发现b、c组各有一颗种植体松动,为防止干扰实验结果,拔除这两颗种植体。剩余的21颗种植体再无松动和脱落的现象,通过使用金属器械杆轻叩种植体顶部,发出的声音清脆提示种植体周围骨结合的状况良好。二、影像学观察1.x线检查:三组种植体-骨界面处没有明显的投射区,周围可见的骨小梁结构仍不清晰,但已有新骨生成。种植体周围未发现骨质疏松现象,与远离种植体-骨界面的骨组织相比,骨密度正常无差别。2.x线骨密度测量:使用ipp6.0软件对三个实验组种植体与骨结合部位所对应的灰度值进行测量,显示a、b、c三组灰度值没有显著的统计学差异。3.micro-ct分析:通过micro-ct扫描重建后,每一个样本选取位于牙槽嵴顶下相同位置,导入ctan分析软件高度为2mm的重建影像。首先选取感兴区域:长为种植体的外缘向近远中各扩展1.5mm,宽为齐种植体颊舌向最外缘的矩形区域,所选取的感兴区域内包含骨小梁结构。通过ctan软件对样本骨块的测量,计算出各项骨小梁形态学参数。通过分析比对结果显示,在比较骨小梁分离度和骨小梁厚度的两项参数时,三组数据之间没有统计学差异。通过分析三组骨小梁数目这一项参数时,mao表面处理组明显高于sla表面处理组,存在统计学差异,同时sla表面处理组也高于纯钛表面无处理组,但是不存在显著的统计学差异。通过分析三组骨小梁骨体积分数,mao和sla表面处理组明显高于纯钛组,均存在统计学差异,但是mao和sla两种处理之间无统计学差异。三、骨矿化沉积率的比较通过一定波长的光谱照射,激发出荧光,显示3组种植体-骨界面周围区域均能呈现蓝、红2种颜色的荧光条带,通过测量荧光带之间的距离来描述新骨矿化沉积的量,再计算出矿化沉积率(mar),结果显示经过表面处理的两组骨沉积高于无处理组,但三组之间不存在显著的统计学差异。四、甲苯胺蓝染色组织形态学分析经过甲苯胺蓝染色后,三个实验组种植体-骨结合界面清晰,新生骨为深蓝色,原有的成熟骨组织染色较浅,二者界限清楚;类骨质为浅蓝色或亮蓝色,成骨细胞呈深蓝色。利用IPP6.0软件测量种植体-骨结合率(BIC)和种植体周围骨面积(BA),经过统计学分析后显示,MAO和SLA两组的表面处理的骨结合能力明显高于没有表面处理的纯钛组,但是两种表面处理组之间不存在显著的统计学差异。结论:1.微纳米双重结构TiO2膜层的微弧氧化处理种植体具有良好生物活性。2.种植体周围骨组织在愈合4周后,通过对种植体周围骨小梁数量进行测量,具有该新型TiO2膜层的MAO表面处理优于SLA表面处理。