调理头皮银屑病的柏叶加味香波制备及功效性评价研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dx0746
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目的:以柏叶洗方为基础方加味中药,制备出一种调理头皮银屑病的洗发香波—柏叶加味香波,对其感官指标、理化指标及皮肤刺激性试验进行考察评价,并应用于咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠模型中,分析其对银屑病样小鼠模型的影响及相关作用机制,为研制一种剂型适当、副作用小、疗效确切、使用简单且便于携带的中药复方香波奠定基础,以期增加头皮银屑病患者的依从性,为广大患者带来福音。方法:1.使用正交设计对中药原液提取工艺和表面活性剂复配工艺进行优化,得出最优的设计工艺,制备出低中高三种不同浓度的柏叶加味香波成品,并观察香波成品的感官指标,进行耐热耐寒试验、p H值测定、泡沫高度测定,最后应用于小鼠皮肤上进行皮肤刺激性试验。2.先将12只BALB/c小鼠设置空白对照组和模型组,参考相关文献进行造模,提示造模成功后,再将60只BALB/c小鼠随机设为空白基质组(CON组)、模型对照组(IMQ组)、乐银洗发液组(LY组)、柏叶加味香波低浓度组(C-L组)、柏叶加味香波中浓度组(C-M组)和柏叶加味香波高浓度组(C-H组),8天后观察小鼠一般情况及体质量趋势,计算脏器指数,并对其背部皮损进行PASI评分,观察组织病理学形态改变,通过实时荧光定量PCR(Real-time q PCR)实验检测小鼠皮损中IL-17A m RNA、IL-23 m RNA的表达水平,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠皮损中IL-17A和IL-23的蛋白表达水平。结果:1.正交实验设计确定中药原液最佳提取工艺为:提取时间1.5h,固液比1∶10,提取次数3次。香波基质表面活性剂最佳用量:月桂醇聚氧乙烯硫酸酯铵(AESA)12%、椰油酰胺二乙醇胺(6501)3%、椰油酰胺丙基甜菜碱(CAB-35)3%;柏叶加味香波成品从外观性状上观察无异物,色泽为浅棕色,香气无刺鼻感觉;通过耐热耐寒试验,发现香波成品无沉淀、分层、絮凝等现象;稀释法测定p H值呈弱酸性,泡沫高度测定为115mm,均符合标准要求;在单次给药和多次给药的皮肤刺激性试验中,发现小鼠皮肤无红斑、水肿等反应。2.造模实验中,与空白对照组相比,使用咪喹莫特乳膏连续涂抹小鼠背部皮肤8天造模,出现典型的红斑上覆白色鳞屑的银屑病样改变,结合HE染色结果显示表皮角化层明显增厚,角化不全伴角化过度,皮下炎细胞浸润等提示银屑病样模型造模成功;正式给药实验中,给药8天后各组小鼠一般情况良好,除CON组外,体质量均不同程度下降。与IMQ组相比,第8日背部银屑病样皮损改善,PASI评分均下降(P<0.01);与CON组相比,其余各组第8日胸腺指数下降,而脾脏指数升高,表明IMQ刺激可能导致胸腺萎缩,刺激脾脏增大,其中LY、C-L与CH组脾脏指数小于IMQ组(P<0.01),表明用药一定程度上缓解炎症反应;与CON组相比,其余几组组织病理学形态均有所改变,与IMQ组相比,HE染色显示,LY、C-L、C-M、C-H组表皮增生情况减轻,厚度变薄,Masson染色显示,CH、CM、LY组纤维组织增生程度减轻,胶原纤维沉积程度减轻;Real-time q PCR和ELISA实验结果显示,与IMQ组相比,LY、C-L、C-M和C-H组小鼠皮肤组织中的IL-17A和IL-23的表达水平均明显下降,均差异显著(P<0.01)。结论:1.柏叶加味香波外观性状良好,质地稳定,p H呈弱酸性,发泡性良好,作用于小鼠皮肤安全且无急慢性刺激。2.柏叶加味香波可以在一定程度上降低IL-17A和IL-23的相对表达量,以抑制银屑病样皮损处炎性因子的表达,阻断IL-23/IL-17-Th17轴的活化,从而改善咪喹莫特诱导的小鼠皮损严重程度,减少表皮层角质细胞和纤维组织的增生,降低小鼠脾脏指数,表明此中药复方香波有一定调理头皮银屑病的作用。
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