高迁移率族蛋白B1介导胰腺癌化疗耐药的试验研究

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目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因不同表达水平对胰腺癌细胞化疗耐药性的影响方法(1)常规培养4株胰腺癌细胞系,设计不同的吉西他滨作用浓度及作用时间处理4株胰腺癌细胞,分别运用RT-PCR、Western Blot方法依次检测药物作用前后HMGB1在转录、翻译水平的表达状况,并分析HMGB1的表达水平与吉西他滨作用情况的关联性。(2)构建针对HMGB1的siRNA真核表达载体pSIREN-HMGB1/siRNA以及HMGB1亚克隆的真核表达载体pBABE-HMGB1,用逆转录病毒转染胰腺癌细胞,筛选稳定表达株,并以相应空转细胞株作为对照组,运用RT-PCR、Western Blot、MTT方法检测相关mRNA、蛋白表达水平及吉西他滨的IC50。结果HMGB1在4株胰腺癌细胞中均有不同程度的表达,其表达水平随吉西他滨作用浓度的增加或作用时间的延长而逐渐升高;沉默HMGB1的表达后胰腺癌细胞的存活率降低;上调HMGB1表达后吉西他滨对胰腺癌细胞的IC50值升高。结论HMGB1介导了胰腺癌细胞对化疗药物的耐药性,降低HMGB1的表达有助于增加胰腺癌对吉西他滨的敏感性。
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