新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫形态学观察和COI基因、18S rRNA基因系统分析

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皮蝇蛆病是由狂蝇科(Ostridae)、皮蝇亚科(Hypodermatidae),皮蝇属(Hypoderma)的蝇虫幼虫感染脊椎动物所导致的一种疾病。幼虫在被感染宿主的皮下寄生,使宿主出现皮肤发炎、皮肤组织被破坏等病症。目前在世界范围内发现的皮蝇亚科、皮蝇属感染动物的主要有牛皮蝇,中华皮蝇,纹皮蝇,鹿皮蝇,驯鹿皮蝇,红鹿皮蝇,以及新发现的藏羚羊皮蝇,其中牛最易感染,山羊、羚羊、绵羊、鹿、马、田鼠、黄鼠、兔、犬、猩猩等动物和人也可感染,但感染数量相对比较少,该病对畜牧业生产尤其是反刍动物造成了严重的危害和经济损失。2010年4月我们在刚从博乐山区捕获归来不久便于新疆石河子市动物园内死亡的两只野生盘羊背部皮下发现了一种皮蝇第三期幼虫,并进行采集和保存。经过资料查阅,未见相关的报道。本研究是根据当前所发现的皮蝇幼虫的形态学观察和分子分类方法进行鉴定,旨在探索和初步确定新疆野生盘羊感染皮蝇第三期幼虫的种属。1、新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫形态学观察通过对新疆野生盘羊所感染的皮蝇第三期幼虫的伪头、体节、体节刺(主要是第三体节背腹部、第十体节腹部)、气门板等部位进行形态学观察,并与资料报道的牛皮蝇、纹皮蝇、中华皮蝇、藏羚羊皮蝇、驯鹿皮蝇的第三期幼虫进行了形态学方面的对比[120]。结果显示:新疆野生盘羊所感染的皮蝇第三期幼虫的大部分形态特征与纹皮蝇三期幼虫较为相似,其相似之处主要表现为:1、在新疆野生盘羊所感染的皮蝇第三期幼虫和纹皮蝇三期幼虫伪头背侧均有两个肉质突起;2、在第二体节背侧有3簇刺,腹侧有5簇刺,在刺的排列方面也几乎一致;2、在第三体节背侧前排刺的大小、排列方式均极为相似,且中间都有圆形肉质突起;3、第十体节腹面均无刺;5、两侧气门板对称,气门钮稍突起,靠近C环,C环未闭合。个别部位的形态学有差异,其差异之处为:1、新疆野生盘羊所感染的皮蝇第三期幼虫第三体节背侧后排刺呈带状排列,而纹皮蝇三期幼虫第三体节背侧无刺;2、新疆野生盘羊所感染的皮蝇第三期幼虫第三体节腹侧前排有刺,后排无刺,体节中间有不规则圆形突起,而纹皮蝇三期幼虫第三体节腹侧前后排均有刺。同其他种类的皮蝇三期幼虫的形态学差异性比较大。2、新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫线粒体COI基因部分片段克隆及序列分析通过对新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫的COI基因片段部分序列进行克隆,结合MAGA5.0和DNASTAR等序列分析软件,对克隆的COI基因部分片段进行了序列分析和同源性比较,建立了系统进化发育树。结果显示新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫COI基因部分序列与纹皮蝇的同源性很高,达到了99.3%,而与其他皮蝇同源性相对较低分别为95.6%、94.1%、93.5%、92.0%、91.8%和90.1%;从所绘制的系统进化树来看,新疆野生盘羊感染的皮蝇第三期幼虫与纹皮蝇的遗传距离最短,并且处于同一分支。3、新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫18S rRNA基因部分片段克隆及序列分析通过对新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫的18S rRNA基因片段部分序列进行克隆,结合MAGA5.0和DNASTAR等序列分析软件对该基因进行了序列分析和同源性比较,建立了系统进化发育树。结果显示新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫18S rRNA基因片段部分序列与纹皮蝇的同源性最高,为99.6%,而同其他皮蝇同源性相对较低分别为97.2%、98.4%、97.4%、98.3%、98.1%、98.6%。从所绘制的系统进化树来看,新疆野生盘羊感染皮蝇第三期幼虫与纹皮蝇的遗传距离最短,并且处于同一分支,同COI基因分析结果基本相一致。通过对研究结果的综合分析和比较,新疆野生盘羊皮蝇三期幼虫与纹皮蝇三期幼虫相近,可初步确定为盘羊纹皮蝇幼虫。
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