万寿菊小孢子时期鉴定及花药培养研究

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2005年6月至2007年3月,从青海大学高原花卉研究中心试验地取万寿菊F1代花蕾进行了三个方面的研究,①小孢子发育时期及其与小花花蕾的外部形态的关系;②两种基本培养基、四种激素组合、六个激素比例对花药愈伤组织诱导率和愈伤组织分化率的影响;③不同基因型的花药培养再生植株的倍性鉴定。结果表明:万寿菊的雄配子发育可分为:减数分裂期、四分体时期、单核期、双核期、三核期、花粉粒六个时期;花序花蕾的苞片尚未开裂,小花长度介于2.3~3.0mm时,小孢子大多处于单核中晚期,是万寿菊花药培养的最佳取材时期。花药培养以MS为基本培养基的愈伤组织诱导率、根分化率、苗分化率都极显著高于B5;MS+6-BA/NAA=20/3最有利于愈伤组织的诱导,MS+6-BA/NAA=50/3最有利于愈伤组织的再分化。愈伤组织诱导在接种后第3~4周到达高峰期;6-BA/NAA组合的诱导高峰期出现最早(16d左右),KT/2,4-D最晚(35d左右)。不同基因型对万寿菊花药培养有显著影响,四种基因型均能诱导出愈伤组织,但诱导率和再分化率差异极大。经细胞学制片鉴定,MS基本培养基附加6-BA/NAA=150/3得到一棵万寿菊单倍体,两棵非整倍体;MS+6-BA/NAA=50/3得到一棵万寿菊单倍体,一棵非整倍体。
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