番茄灰叶斑病和黄萎病是番茄生产上经常出现的两种主要病害,Sm和Ve基因分别是番茄灰叶斑病和黄萎病的主要抗病基因。本研究以番茄灰叶斑病的抗病纯合体(Sm/Sm)、抗病杂合体(Sm/sm)和感病纯合体(sm/sm)为实验材料,根据与Sm基因紧密连锁的RFLP标记序列,设计特异引物进行PCR扩增,对PCR扩增产物进行序列分析寻找酶切位点,创建了一个新的与抗病基因Sm紧密连锁的CAPS标记“T050”;以番茄黄萎病抗病纯合体(Ve/Ve)、抗病杂合体(Ve/ve)和感病纯合体(ve/ve)为实验材料,参考已发表的相关文献设计特异性引物进行PCR扩增,筛选获得的了一个与抗病基因Ve紧密连锁的SCAR标记“Ve-1”。在此基础上,对上述获得的两个分子标记进行了有效性验证,同时将“T050”与“Ve-1”标记初步应用于番茄育种材料的筛选与鉴定。“T050”CAPS标记:利用特异性引物T050F/T050R对不同基因型番茄进行PCR扩增,所有实验材料均扩增出片段大小为651 bp的特异条带。经Scr F I酶酶切后,抗病纯合基因型材料产生一条片段大小为651bp的特异条带,抗病杂合基因型材料产生三条片段大小分别为651 bp、355 bp和296 bp的特异条带,感病纯合基因型材料产生了两条片段大小分别为355 bp和296 bp的特异条带。引物序列为T050F:5’-ATC ACC CTT CTG CCT TTT CTT C-3’;T050R:5’-ATC TGG GAT CTG AAT GTC ATC CTC-3’。以9种不同遗传背景、不同来源的番茄品种为实验材料,对获得的“T050”标记进行验证。结果表明该分子标记稳定、可靠,是一个共显性分子标记。利用“T050”标记对91份未知基因型的番茄育种材料进行了鉴定,筛选出抗灰叶斑病纯合基因型材料20份,抗灰叶斑病杂合基因型材料6份。“Ve-1”SCAR标记:利用特异性引物Ve-1F/Ve-1R对实验材料进行PCR扩增,抗病纯合基因型材料出现1050 bp的特异条带,抗病杂合基因型材料出现1050 bp和1000 bp两条特异性条带,感病纯合基因型材料出现1000 bp的特异条带。引物序列为:Ve-1F:5’-CCA TGA ACA GAT GTG ACT TGT GTG-3’;Ve-1R:5’-CGA TAA CAA CCA ACT CTC TGT CTC-3’。以12种不同遗传背景、不同来源的番茄品种为实验材料,对获得的“Ve-1”标记进行了有效性验证。同时,利用该标记对120份未知基因型的番茄育种材料进行了鉴定,筛选出抗黄萎病纯合基因型材料94份,抗黄萎病病杂合基因型材料3份。本研究创建的抗病基因分子标记“T050”和“Ve-1”,为番茄抗病种质材料的筛选与鉴定提供了技术支撑。筛选获得的抗灰叶斑病和黄萎病种质材料为进一步培育复合抗病性的番茄新品种奠定了基础。