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研究背景:冻伤是一种寒冷所致的损伤,常发生于军事训练活动中,其次在寒冷地区的民事作业中也时有发生。冻伤分为轻度冻伤（Ⅰ-Ⅱ度）和重度冻伤（Ⅲ-Ⅳ度）,冻伤的组织损伤机制包括前期细胞内液和外液冰晶形成导致细胞死亡的直接损伤和后期微血栓形成引起组织缺血的间接损伤（类似于缺血再灌注损伤）,严重冻伤的传统治疗方式包括早期的复温治疗及后期外科截肢治疗,具有较高的致残率,近年来相关报道经导管动脉溶栓治疗可明显降低严重冻伤后的截肢率。目的:（1）建立新西兰白兔的严重冻伤模型并进行大体、影像学、血液学及病理学的实验观察。（2）探究经导管动脉灌注复方丹参注射液治疗严重冻伤的有效性及机制。方法与材料:（1）采用乙醇浸泡法建立新西兰白兔的严重冻伤模型12只,常规复温治疗后进行实验观察。10只新西兰白兔的严重冻伤模型分别于冻伤前、冻伤后复温前、复温后Oh、6h、12h、24h、2d、3d、4d、5d进行受累肢端肿胀程度、皮肤颜色观察及血管造影;于冻伤前、复温后Oh、6h、12h、24h、2d、3d经耳缘静脉抽取静脉血采用全自动分析仪进行血常规（WBC、RBC、HGB、HCT、PLT）、血生化（ALT、AST、BUN、SCR）、凝血及纤溶活性指标（PT、APTT、FIB）检测,采用放免分析法测定血浆TXB2和6-keto-PGF1 α含量,采用TBA比色法测定血浆MDA的含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定血浆SOD含量;剩余2只于冻伤前、冻伤后复温前、复温后Oh、6h、12h、24h、2d、3d、4d、5d进行受累肢端常规组织病理学检查;采用截趾率和得分法进行统计新西兰白兔严重冻伤模型的自然预后截肢率。（2）36只新西兰白兔的严重冻伤模型进行常规复温及处理,分层随机分成3组,每组12只进行溶栓治疗,A组:常规溶栓组（t-PA+肝素+罂粟碱）;B组:改良溶栓组（t-PA+肝素+罂粟碱+复方丹参注射液）;C组:对照组（生理盐水）,每组10只新西兰白兔的严重冻伤模型于溶栓后24h进行患肢动脉造影并评估应答,于溶栓后24h经耳缘静脉抽取静脉血采用全自动分析仪进行血常规（WBC、RBC、HGB、HCT、PLT）、凝血及纤溶活性指标（PT、APTT、FIB）检测并进行组间比较,采用放免分析法测定血浆TXB2和6-keto-PGF1 α含量并进行组间比较,采用TBA 比色法测定血浆MDA的含量并进行组间比较,采用黄嘌呤氧化酶法测定血浆SOD含量并进行组间比较;每组剩余2只于溶栓后24h进行受累肢端常规组织病理学检查;采用截趾率和得分法进行统计各组新西兰白兔严重冻伤模型的最终截肢率并进行组间比较。结果:（1）新西兰白兔严重冻伤模型复温后Oh至复温后12h受累肢端皮肤颜色由紫蓝色转为粉红色,肿胀程度逐渐加重,肢端血管造影显示血流逐渐恢复,复温后12h至截肢皮肤颜色由粉红色转变为紫蓝色至最后变为黑色,肿胀程度减轻至最后干瘪,肢端血管逐渐闭塞,血流逐渐消失,皮肤颜色紫蓝色或暗黑色区域可大致对应血管闭塞区。新西兰白兔严重冻伤模型复温后Oh至3d白细胞水平持续升高;RBC、HGB、HCT变化趋势基本保持一致,RBC、HGB、HCT水平于复温后Oh开始升高,12小时达到高峰,24h恢复冻伤前基线水平,2d、3d下降;血小板水平于复温后Oh至2d下降,24h到达低峰,3d恢复升高;ALT、AST、BUN、SCR值较冻伤前基线相比无明显差异（P>0.05）;血浆6-keto-PGF1 α水平复温后Oh至12h水平持续升高,12h到达高峰,24h至3d开始下降;血浆TXB2水平于复温后Oh至3d持续升高;血浆MDA水平于复温后Oh至3d持续升高;血浆SOD水平复温后Oh至24h水平持续升高,24h到达高峰,2d至3d开始下降;新西兰白兔严重冻伤模型左前肢血管病理结果显示复温后Oh到24h大量血管扩张淤血或充血,未见明显血栓,复温后2d至5d血管内可见混合血栓;最终截趾率为82.5%,得分法为20.6±3.8。（2）A、B及C组新西兰白兔严重冻伤模型溶栓治疗后血管造影完全缓解分别为0、3、0例,大部分缓解分别为2、4、0例,轻度缓解分别为4、2、2例,无缓解分别为4、1、8例;各组间模型溶栓治疗后WBC数量比较具有显著性差异（P均<0.05）;RBC、HGB、HCT 比较无显著性差异（P均>0.05）;A、B组模型溶栓治疗后血小板数量明显高于C组（P均<0.05）;A、B组模型溶栓治疗后PT、APTT显著地长于C组（P均<0.05）;A、B组模型溶栓治疗后FIB显著地低于C组（P均<0.05）;B组模型溶栓治疗后血浆6-keto-PGF1、SOD含量显著地高于A和C组（P均<0.05）;B组模型溶栓治疗后血浆TXB2、MDA含量显著地低于A和C组（P均<0.05）,A、B、C组模型截趾率分别为46.9%、22.5%、85.0%,得分法结果分别为9.5±2.7、4.3±1.1及21.8±4.2;各组间模型截趾率及得分法比较均有显著性差异（P均<0.05）。结论:（1）新西兰白兔严重冻伤模型大体、血管造影及病理学观察显示严重冻伤复温后Oh至复温后12h受累肢端血流逐渐恢复,复温后24h血栓形成,血管逐步闭塞,血液学改变显示冻伤后血液处于高凝状态,机体出现严重的炎症反应,PGI2-TXA2及氧化-抗氧化系统失衡。（2）复方丹参注射液可明显降低新西兰白兔严重模型的截趾率,可能的机制是复方丹参注射液可有效纠正严重冻伤后机体内PGI2-TXA2及氧化-抗氧化的失衡。