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抑郁症是临床上一种严重危害人类身心健康的常见疾病。近年来,发病率呈持续上升趋势,严重威胁人们的身心健康,并对人们的日常生活和工作产生不良影响。但由于抗抑郁药物存在明显的不良反应与副作用,故而关于该领域的研究具有较好的临床意义及应用前景。中医治疗情志类疾病的经典方逍遥散治疗抑郁症,疗效确切,其相关机制值得我们进一步研究和探讨。目的:本次实验研究,旨在证实疏肝解郁方药逍遥散,可以通过作用于慢性应激下受损的海马神经元细胞,下调其分子伴侣蛋白(FKBP5)表达,增强糖皮质激素受体(GR)活性,增加脑源性神经营养因子(BDNF)表达水平,从而达到改善其海马神经可塑性的作用,并试图通过调节肝脏和缓解神经细胞的调节作用可塑性,发挥抗应激损伤效果的相关分子生物学机制。方法:实验一(体内实验)通过慢性不可预知性应激刺激(CUMS)建立FKBP5基因敲除小鼠慢性应激模型。将小鼠随机分为空白对照组,应激模型组,逍遥散中药低剂量组、逍遥散中药中剂量组、逍遥散中药高剂量组以及GR受体阻断剂组六个组。经过42天的慢性应激刺激之后,对各组小鼠分别进行行为学指标检测,通过HE染色和MAP-2荧光免疫组化法进行组织学观察。采用qRT-PCR法对小鼠海马中GR、BDNF的mRNA的表达进行检测,Western Blot法对小鼠海马中pGR、GR、BDNF的蛋白表达进行检测。因此,在体内实验水平上,讨论了逍遥散对慢性应激损伤小鼠海马神经重塑性的作用机制。实验二(细胞实验)建立糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)应激细胞损伤模型。将原代培养7-8天的神经元分为皮质酮+逍遥散低剂量对照组、皮质酮+逍遥散低剂量应激模型组、皮质酮+逍遥散+FKBP5低表达海马神经元、皮质酮+逍遥散+FKBP5过表达、皮质酮+GR受体激动剂、皮质酮+GR受体阻断剂干预组。常规光镜和倒置相差显微镜观察1天和7天的神经元形态、CCK8用于检测细胞增殖活性;Western blot法检测原代培养神经元GR、BDNF和FKBP5的蛋白和mRNA的表达。从体外实验水平,对于逍遥散对糖皮质激素诱导的海马神经可塑性的作用机制进行研究探讨。结果:实验一(动物实验)1、模型组小鼠活动路程明显减少,休息时间延长,与空白对照组相比较有明显差异(P<0.05)。与模型组相比较,各逍遥散给药组小鼠活动路程、活跃度均较高,休息时间则低于模型对照组,统计学差异明显(P<0.05);2、模型组小鼠糖水偏好率下降,与空白对照组相比有统计学意义(P<0.05)。中药低中高各剂量组及米非司酮组小鼠的糖水偏好度提高,相比模型组有明显差异(P<0.05);3、Western—blot结果显示,与空白对照组相比,模型对照组小鼠中GR,BDNF平均光密度值降低。与模型对照组相比,各逍遥散给药组GR,BDNF平均光密度值都有显著上调(P<0.05)。4、mRNA定量PCR结果显示与空白对照组相比,应激模型组及各个给药组GR,BDNF mRNA表达水平均显著降低。实验二(细胞实验)1、FKBP5过表达时,细胞活性有抑制作用,而对其进行干扰时,细胞活性则得到加强。2、FKBP5过表达时,细胞GR入核减少,而对其进行干扰时,入核增加。且干扰FKBP5表达时,细胞中BDNF表达增加,也说明了 FKBP5过表达对损伤细胞具有一定的保护作用。结论:逍遥散可以通过调控慢性应激损伤小鼠海马神经元细胞内FKBP5表达情况,达到促进GR入核的活性加强,增进GR靶基因BDNF的表达,改善海马神经可塑性,从而发挥抗应激损伤的效果。FKBP5过表达可影响GR入核活性,致使BDNF表达增强,从而对损伤细胞发挥出一定的保护作用。