烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）在世界范围内都有分布,可侵染十字花科、茄科、菊科等多种植物,是具有经济重要性的植物病毒之一。黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus,CMV）的寄主十分广泛,能侵染85科1000多种植物。TMV可以与CMV复合侵染,不仅造成植物品质的下降同时可以造成巨大的经济损失。TMV、CMV引起的病毒病不但危害严重,其防治也相当困难。鸦胆子（Brucea javanica（L.）Merr）、臭椿（Ailanthus altissima Swingle）均系苦木科（Simaroubaceae）植物果实,为传统中药。在本实验室以前的研究中,已经得出,在接种TMV 6-8h后的普通烟K₃₂₆,1.0 mg/mL的鸦胆子和臭椿粗提物处理的病毒增殖抑制率分别为90.9%和89.4%;分别利用半叶法和叶碟法测定了鸦胆子素D的抗TMV侵染和增殖作用,结果为,在0.025mg/mL浓度下抗TMV侵染效果达到75%以上,而在2×10^-3mg/mL的浓度下其抗TMV增殖作用仍达到60%。Bruticine D（Y-D）、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对TMV有很好的抑制增殖的作用,为了研究Y-D、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对TMV核酸、CMV核酸在寄主体内的增殖情况的影响,本实验采用了semi-quanfitive RT-PCR的方法,对TMV-RNA的复制酶基因、外壳蛋白基因（CP）、运动蛋白基因（MP）、烟草内参基因（actin gene）和CMV-RNA3分别进行了退火温度优化、Mg²⁺浓度优化、循环次数优化,进一步研究接种TMV 6h的普通烟K₃₂₆和接种CMV 12h的假酸浆（Nicandra physalodes（L.）Gaertner）,用Y-D、鸦胆子粗提物和臭椿粗提物对其处理48h,检测三种药剂对TMV、CMV的RNA的抑制作用。同时采用quantitivereal-time PCR的方法,检测Y-D对TMV-RNA、CMV-RNA的抑制作用,对TMV基因组、TMV-CP亚基因组和TMV-MP亚基因组的抑制率分别为93.04%、94.79%和95.82%。两种方法的结果是相同的,不仅确定了Bruceine D、鸦胆子粗提物、臭椿粗提物对寄主体内的TMV-RNA的增殖有很强的抑制作用。同时证明了semi-quantitative RT-PCR实验结果的正确性,证明了semi-quantitative RT-PCR技术的可靠性,在相对定量的研究中,由于荧光实时定量PCR仪价格昂贵,当条件有限时,如果操作得当,半定量PCR法可以替代荧光定量PCR法,得到应用。但对CMV-RNA的抑制作用从实验结果看是抑制增殖作用不强,但并不能就此断定三种药剂对CMV没有抑制增殖的作用,也就不能做出Bruceine D、鸦胆子粗提物、臭椿粗提物三种药剂对+ssRNA病毒在寄主体内不具有广谱的抑制作用,还可以从蛋白等方面进一步研究药剂的抗病毒作用。