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元宝草(Hypericum sampsonii Hance)系藤黄科金丝桃属多年生草本植物,原产我国,为我国特有种,具有重要的药用价值。该属植物所含的金丝桃素类、黄酮类等物质具有抗抑郁、抑制中枢神经、抗病毒和增强免疫功能等作用,从而引起医药界的广泛重视。本文首次在植物学、植物化学和组织培养方面对元宝草进行了系统的研究,获得了一些有价值的成果,填补了元宝草在该领域的研究空白,为元宝草药用价值的开发利用提供了重要科学依据。本论文主要涉及如下几方面内容: 1.经系统溶剂提取及反复层析,分离纯化,得到了金丝桃素、芦丁、金丝桃苷和槲皮素4个化合物,通过波谱和理化分析,鉴定了其结构。此研究丰富了金丝桃属药用植物的化学内容,为开发利用元宝草作为药用植物奠定了坚实的理论基础。 2.建立了元宝草中主要活性成分金丝桃素的HPLC定量分析方法。本方法有良好的重现性及精密性,为金丝桃属植物的金丝桃素质量控制提供了检测方法。 3.通过GC/MS分析,计算机检索,从元宝草叶及果实中分别分离鉴定了30和44种挥发性物质。结果表明,叶与果实中的挥发油化学成分相差很大;果实中不含罗勒烯,而叶中的罗勒烯占叶挥发油总量的14.49%。博士学位论文 摘 要 2001年 11月 4.对元宝草与贯叶连翘中的金丝桃素含量进行了对比研究,结果表明,不论是试管苗、幼株、开花植株和花,它们中的金丝桃素含量基本相同。表明元宝草也是一种重要的金丝桃素类药源植物。 5.元宝草化学成分分布与其分泌结构紧密相关。根据形态结构特点可将分泌结构分为分泌细胞团、分泌囊和分泌道3类。前者含金丝桃素类物质,后二者含挥发油类物质。叶片、花瓣中分泌细胞团腺体的数量最多,尊片中的次之。个 6.利用植物组织培养技术,建立了元宝草稳定离体培养再生体系。元宝草愈伤组织易于诱导,生长速度快,并容易再分化成丛芽;带芽点愈伤组织继代增殖能力旺盛,己持续两年半不衰减,同时无玻璃化苗出现;愈伤组织和茎节(在节结处直接器官分化产生一圈成簇的不定芽)均能再生成植株,其移栽成活率高,可达92.5%。 . 7.研究元宝草外植体的脱分化和再分化的特点结果表明,茎段和叶片启动形成愈伤组织,其不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,茎节叶腋的叶隙薄壁组织在激素的诱导下启动、分裂,不形成愈伤组织而直接器官分化成芽原基,并在节结处产生一圈成簇的不定芽,表明元宝草不同部位的细胞启动及器官分化调控存在差异。 8.元宝草植株中总黄酮的含量较高,为4.33%,而带芽点的愈伤组织中的总黄酮含量高出前者1.54%,为s.87%。说明带芽点的愈伤组织细胞具有合成黄酮 ‘“””””“““’””’“”“““一’”—”””—”一‘””””“”””‘”“””””““”“———””’““””’“一”””””“t类次生代谢产物的能力,有利于通过细胞培养生产黄酮类物质。