黄曲霉毒素适配体传感器检测方法建立及其稳定性研究

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xpzcz1993
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黄曲霉毒素B1(AFB1)是毒性最强的霉菌毒素之一,引起了全球在饲料和食品安全领域的关注。为了阻止污染的饲料和食品带来的食品安全恐慌和经济损失,开发AFB1快速,灵敏和特异性的检测方法显得极其重要。本文开发了一种简单,超灵敏和可靠的适配体传感器检测AFB1。该方法利用AFB1的适配体作为分子识别探针,与适配体互补的DNA作为实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)的模板产生信号。优化条件下,该方法的检测范围为5.0×10-5~5.0ng·mL-1,极高的灵敏度为25fg·mL-1。本研究选择其他的八种霉菌毒素作为干扰物检测后Ct值没有明显的改变,表明适配体传感器对AFB1极好的特异性。同时该传感器也可以应用于实际样品羊草和婴幼儿米粉中AFB1的检测,获得满意的回收率分别为88%~127%和94%~119%。该方法在定量和高通量检测饲料和食品中的霉菌毒素方面有很大的潜在应用,并且检测的目标物还可以扩大到更大的范围。AFB1可以直接污染食品,或者间接污染饲料,动物采食AFB1后,在奶中产生代谢物黄曲霉毒素M1(AFM1)[1,2]。AFM1被IARC归类为次级组致癌物质,其毒性比AFB1弱[3]。本研究旨在通过检测生鲜乳不同储存条件下黄曲霉毒素M1(AFM1)的残留水平分析AFM1的储存稳定性,储存条件包括储存温度,储存时间,复温温度、解冻次数和添加防腐剂等。研究结果表明,在不同的储存条件下,包括4℃冷藏保存,-20℃冷冻保存,-20℃冷冻保存24h后复温温度,反复冻融后解冻次数以及添加不同的防腐剂对生鲜乳中AFM1的残留量均无显著影响,回收率检测值均在80%~110%范围内。目前牛奶储存前后其AFM1残留变化及降解率研究鲜有报道。本研究探讨了牛奶安全监测工作中AFM1的最佳储存条件,为保证牛奶监测结果的准确性提供理论支持。
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