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目的探究程序性死亡受体-1(Programmeddeath-1,PD-1)及其配体1(PD-1 ligand 1,PD-L1)在原发性胆汁性胆管炎(Primary Biliary Cholangitis,PBC)免疫机制中的作用。方法收集PBC患者外周血和肝脏病理标本,流式细胞术检测PD-1在PBC患者CD8+ T细胞和Treg细胞的表达情况,免疫荧光共定位检测PD-L1在肝脏胆管细胞表达情况,ELISA测定血浆中PD-1/PD-L1通路相关细胞因子表达水平,RT-PCR法测定CD8+T淋巴细胞中PD-1/PD-L1通路相关调控通路的表达。通过体外细胞共培养,探究PD-1/PD-L1通路调控在CD8+细胞毒细胞中对PBC靶细胞人肝内胆管上皮细胞杀伤作用中的作用。结果本研究共入组就诊于北京协和医院的PBC患者69例,健康对照者58例。PBC患者外周血CD8+T淋巴细胞PD-1表达(12.0±8.8%)比健康对照(19.9±12.5%)降低(p<0.001),PBC患者Treg细胞比例(5.6±3.7%)较健康对照(7.4±2.4%)显著下降(p = 0.005),且PD-1+细胞占FoxP3+CD4+ T细胞比例显著升高(29.9±11.8%v.s.25.8±8.1%,p = 0.044)。PBC 组血浆 IL-10 浓度、IFN-γ 浓度、TGF-β 浓度高于健康对照(IL-10 8.29±9.00 pg/ml v.s.4.43±5.08 pg/ml,p=0.0066;IFN-y 51.94±52.94 pg/ml v.s.26.71±26.26 pg/ml,p = 0.0015;TGF-β 1302.0±1972.8 pg/ml v.s.205.8±298.9 pg/ml,p = 0.0018)。RT-PCR 测定发现 PBC 组(n=21)较健康对照组(n=19)CD8+T淋巴细胞Tbet基因表达量升高(3.03±4.23v.s.0.82±0.76,p=0.028),Pdcd1基因表达有下降趋势,但无统计学意义(0.59±0.73v.s.1.49±2.20,p = 0.110)。肝脏免疫荧光共定位发现,PBC患者组肝脏内PD-L1阳性细胞较少,未见胆管细胞与PD-L1双阳性细胞。在与HiBEC共培养体系中,PD-1+CD8+T细胞较PD-1-CD8+T细胞细胞毒杀伤能力弱,增殖下降,TGF-β、IFN-γ有下降趋势,且靶细胞凋亡相对较少,这种效应在一定程度上可以被抗PD-1抗体拮抗,而在PD-L1促进下有所增强。结论在PBC的发病的免疫机制中,PD-1上游核内转录因子Tbet表达上调,抑制了 CD8+ T细胞PD-1的表达,引起了 CD8+ T细胞表面PD-1表达降低,同时胆管上皮细胞PD-L1可能存在表达下调。在包括IL-10、IFN-γ、TGF-1β等细胞因子的相互作用和共同调节下,PD-1/PD-L1通路沉默,低PD-1表达的CD8+ T细胞增殖增多、细胞毒性功能增强、产生相关细胞因子,负调节性的Treg细胞减少,引起对肝内胆管上皮细胞的杀伤作用。